Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng BCA at Bradford assay ay ang BCA assay ay nakakaubos ng oras at hindi gaanong tumpak, samantalang ang Bradford assay ay mabilis at tumpak.
Ang BCA at Bradford assay ay dalawang paraan ng assay ng pagtukoy ng konsentrasyon ng protina. Ang dalawang assay na ito ay may magkaibang prinsipyo ng assay at pagkakaiba sa kanilang katumpakan.
Ano ang BCA Assay?
Ang BCA assay o bicinchoninic acid assay ay isang biochemical assay na kapaki-pakinabang sa pagtukoy ng kabuuang konsentrasyon ng protina sa isang solusyon. Ang pamamaraang ito ay pinangalanan din bilang Smith assay pagkatapos ng imbentor nito, si Paul K. Smith. Ang analytical na paraan na ito ay nagpapakita ng pagkakatulad sa Lowry protein assay, Bradford protein assay o biuret reagent. Maaari nating obserbahan ang kabuuang konsentrasyon ng protina sa isang naibigay na sample sa pamamagitan ng pagbabago ng kulay ng sample solution, na napupunta mula berde hanggang lila. Ang pagbabago ng kulay na ito ay nangyayari sa proporsyon sa nilalaman ng protina. Pagkatapos noon ay maaari tayong gumamit ng isang colorimetric na pamamaraan upang suriin ang intensity ng kulay at nilalaman ng protina sa sample.
BCA Paraan ng Pagtatantya ng Protein
Kapag isinasaalang-alang ang mekanismo ng BCA assay, ang karaniwang BCA solution ay naglalaman ng mataas na alkaline na solusyon na may pH na halos 11.25, at ang mga sangkap sa solusyon na ito ay kinabibilangan ng bicinchoninic acid, sodium carbonate, sodium bicarbonate, sodium tartrate, at tanso(II) sulfate pentahidrate. Pangunahing nakasalalay ang assay na ito sa dalawang reaksiyong kemikal: ang pagbabawas ng tanso(II) sa tanso(I) ng mga peptide bond sa protina at chelation ng dalawang molekula ng bicinchoninic acid na may copper(I) ion, na nagreresulta sa isang kulay-ube na complex na maaaring sumipsip ng liwanag sa 562 nm wavelength. Sa unang reaksyon, ang halaga ng tanso(II) na binawasan ng mga peptide bond ay proporsyonal sa dami ng protina sa sample.
Ano ang Bradford Assay?
Ang Bradford assay ay isang spectroscopic analytical method na kapaki-pakinabang sa pagsukat ng konsentrasyon ng protina sa isang solusyon. Ang paraang ito ay binuo ni Marion M. Bradford noong 1976, at ito ay isang medyo mabilis at tumpak na pamamaraan.
Color Reaction ng Protein at Bradford Reagent
Maaari naming gamitin ang paraang ito upang matukoy ang konsentrasyon ng halaga ng protina sa isang sample. Ang kemikal na reaksyon na nagaganap sa sample sa panahon ng assay na ito ay nakasalalay lamang sa komposisyon ng amino acid ng protina sa sample.
Bradford Method of Protein Estimation
Kung isasaalang-alang ang paraan ng assay na ito, isa itong colourimetric protein assay na nakabatay sa absorbance shift ng dye na pinangalanang Coomassie Brilliant Blue G-250. Sa pangkalahatan, ang pangulay na ito ay umiiral sa tatlong anyo bilang anionic (asul) na anyo, neutral (berde) na anyo at cationic (pula) na anyo. Samakatuwid, sa ilalim ng acidic na mga kondisyon, binabago ng tina ang kulay nito mula pula hanggang asul. Ito ay dahil sa pagbubuklod ng protina sa tina. Sa kabaligtaran, kung walang protina na magbibigkis sa pangulay, hindi lilitaw ang pagbabago ng kulay, ang solusyon ay makakakuha ng pulang kayumanggi na kulay. Ang dye na ito ay may kakayahang bumuo ng isang malakas, noncovalent complex na may carboxyl group ng protina sa pamamagitan ng Van der Waal forces at electrostatic attractions.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng BCA at Bradford Assay?
Ang BCA at Bradford assay ay dalawang paraan ng assay ng pagtukoy ng konsentrasyon ng protina. Ang dalawang assay na ito ay may magkaibang mga prinsipyo ng assay at mga pagkakaiba sa kanilang katumpakan. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng BCA at Bradford assay ay ang BCA assay ay nakakaubos ng oras at hindi gaanong tumpak, samantalang ang Bradford assay ay mabilis at tumpak.
Ang sumusunod na infographic ay nagbubuod ng mga pagkakaiba sa pagitan ng BCA at Bradford assay sa tabular form.
Buod – BCA vs Bradford Assay
Ang BCA assay o bicinchoninic acid assay ay isang biochemical assay na kapaki-pakinabang sa pagtukoy ng kabuuang konsentrasyon ng protina sa isang solusyon. Ang Bradford assay ay isang spectroscopic analytical method na kapaki-pakinabang sa pagsukat ng konsentrasyon ng protina sa isang solusyon. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng BCA at Bradford assay ay ang BCA ay nakakaubos ng oras at hindi gaanong tumpak, samantalang ang Bradford assay ay mabilis at tumpak.
