Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng bradford at lowry protein assay ay ang Bradford protein assay ay batay sa absorbance shift ng dye Coomassie brilliant blue G-250 habang ang Lowry protein assay ay batay sa reaksyon ng mga copper ions (Cu+) ions ginawa sa pamamagitan ng oksihenasyon ng mga peptide bond na may Folin–Cioc alteu reagent.
Ang assay ay isang analytical technique na tumutulong sa pagkilala sa mga pangunahing functional na bahagi ng isang sample. Samakatuwid, ang isang assay ay maaaring alinman sa isang qualitative o quantitative na pagsubok. Maraming larangan kabilang ang laboratoryo na gamot, pharmacology, environmental biology, molecular biology, biochemistry, at immunology ay regular na gumagamit ng ganitong uri ng mga pagsusuri. Ang Bradford at Lowry protein assay ay dalawang biochemical assay na tumutukoy sa konsentrasyon ng protina sa isang sample na solusyon. Parehong gumagamit ang mga assay ng mga colorimetric technique para magbigay ng mga resulta.
Ano ang Bradford Protein Assay?
Ang Bradford protein assay ay isang mabilis na spectroscopic analytical na pamamaraan para sa pagsusuri ng protina. Nagpapakita ito ng mataas na katumpakan kapag sinusukat ang konsentrasyon ng protina sa isang solusyon. Ipinakilala ni Marion Bradford ang pamamaraang ito noong 1976. Sa assay na ito, ang kabuuang reaksyon ay batay sa komposisyon ng amino acid ng mga protina na sinusukat. Sa ibang mga termino, ang Bradford protein assay ay isang colorimetric assay. Gumagamit ito ng pangkulay na Coomassie brilliant blue. Samakatuwid, ang colorimetric protein assay na ito ay nakasalalay sa absorbance shift ng dye. Ang Coomassie brilliant blue G-250 ay umiiral sa tatlong format: cationic (pula), anionic (asul) at neutral (berde). Sa panahon ng acidic na mga kondisyon, ang pulang anyo ng pangulay ay nagiging asul. Kinukumpirma nito ang pagbubuklod ng protina. Kung ang protina ay wala, ang solusyon ay maaaring manatili sa kulay kayumanggi.
Figure 01: Bradford protein assay
Bradford protein assay ay naiiba sa iba pang protina assay dahil hindi ito madaling kapitan sa mga interference ng iba't ibang kemikal na compound na nasa solusyon ng protina. Kasama sa mga compound na ito ang sodium, potassium, glucose, at sucrose, atbp.
Ano ang Lowry Protein Assay?
Ang Lowry protein assay ay isang biochemical assay na ginagamit upang matukoy ang kabuuang antas ng protina sa isang solusyon. Si Oliver H. Lowry ang taong bumuo ng reagent na ito noong 1940. Inilalarawan ng pamamaraan ang kabuuang konsentrasyon ng protina ng solusyon sa pamamagitan ng pagbabago ng kulay na proporsyonal sa konsentrasyon ng protina sa solusyon. Kaya, isa rin itong colorimetric protein assay.
Ang reaksyon sa pagitan ng mga copper ions (Cu+) na ginawa ng oksihenasyon ng mga peptide bond at Folin–Cioc alteu reagent ang batayan ng pamamaraang ito. Gayundin, ang reagent na ito ay naglalaman ng phosphomolybdic acid at phosphor-tungstic acid. Gayunpaman, ang mekanismo ng reaksyon ng Lowry protein assay ay hindi lubos na nauunawaan. Ngunit ito ay nagsasangkot ng oksihenasyon ng cysteine, tryptophan at tyrosine residues sa pamamagitan ng pagbabawas ng Folin–Cioc alteu reagent.
Figure 02: Lowry protein assay
Ang mga residue ng cysteine ay nakakatulong sa pagsipsip na naobserbahan sa Lowry protein assay at ang reaksyon ay nagreresulta sa isang makinang na asul na molekula; heteropoly molibdenum na asul. Ang pagbawas ng molekula na ito ay sinusukat sa pamamagitan ng pagsipsip sa 660nm. Kaya naman, ang konsentrasyon ng mga residue ng cysteine at tryptophan na nagbawas ng Folin–Cioc alteu reagent ay nagbabawas sa kabuuang konsentrasyon ng protina sa solusyon.
Ano ang Mga Pagkakatulad sa pagitan ng Bradford at Lowry Protein Assay?
- Bradford at Lowry protein assays ay tumutukoy sa konsentrasyon ng protina sa isang solusyon.
- Ang parehong paraan ay colorimetric na pamamaraan.
- Gayundin, mataas ang sensitivity ng parehong paraan.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng Bradford at Lowry Protein Assay?
Ang Bradford at Lowry protein assay ay dalawang uri ng assay na tumutukoy sa konsentrasyon ng protina sa isang solusyon. Ang Bradford protein assay ay umaasa sa absorbance shift ng dye Coomassie brilliant blue G-250 habang ang Lowry protein assay ay nakasalalay sa reaksyon ng mga copper ions na ginawa ng oksihenasyon ng mga peptide bond, na may Folin–Cioc alteu reagent. Kaya, ito ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng Bradford at Lowry protein assay. Ang Bradford protein assay ay tumatagal ng 15 minuto upang makagawa ng isang resulta habang ang Lowery protein assay ay tumatagal ng 40-60 minuto upang makagawa ng isang resulta. Kaya, ito ay isa pang pagkakaiba sa pagitan ng Bradford at Lowry protein assay. Higit pa rito, ang Bradford protein assay ay nakasalalay sa komposisyon ng amino acid habang ang Lowry protein assay ay bahagyang nakadepende sa komposisyon ng amino acid. Kaya, isa rin itong pagkakaiba sa pagitan ng Bradford at Lowry protein assay.
Sa ibaba ng inforaphic ay nagbibigay ng higit pang mga detalye sa pagkakaiba sa pagitan ng Bradford at Lowry protein assay.
Buod – Bradford vs Lowry Protein Assay
Ang assay ay isang analytical technique na ginagamit upang tukuyin ang pangunahing functional component ng isang sample. Ang Bradford at Lowry protein assay ay dalawang uri ng protein assays na gumagana sa ilalim ng colorimetric techniques. Ang parehong Bradford at Lowry protein assays ay tumutukoy sa konsentrasyon ng protina sa isang solusyon. Gayunpaman, ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng Bradford at Lowry Protein Assay ay nakasalalay sa colorimetric technique na ginagamit nila. Gumagamit ang Bradford protein assay ng Coomassie brilliant blue G-250 habang ang Lowry protein assay ay gumagamit ng mga copper ions (Cu+) ions at Folin–Cioc alteu reagent. Higit pa rito, ang paraan ng Bradford ay nagbibigay ng mabilis na mga resulta kaysa sa Lowry protein assay. Gayunpaman, ang parehong mga pamamaraan ay napakasensitibong mga pamamaraan at napapailalim sa mga interference mula sa iba't ibang mga sangkap.
