Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng radioimmunoassay at immunoradiometric assay ay na sa radioimmunoassay, ang sample o compound na susukatin ay pinagsama sa isang radioactive antigen bago ang kumbinasyon, habang sa immunoradiometric assay, ang sample o compound ay agad na pinagsama sa radiolabeled antibodies.
Ang immunoassay ay isang biochemical test na nakikita ang presensya o konsentrasyon ng mga macromolecule sa isang solusyon gamit ang isang antibody o antigen. Ang fluorescent at radioactive antibodies ay ginagamit upang sukatin ang mga antigen sa isang sample. Sa una, ang mga antibodies ay ginamit sa mga diskarte sa pag-ulan tulad ng immunoprecipitation, immunodiffusion at immune-electrophoresis para sa pagsusuri ng serum protein. Sa kasalukuyan, ginagamit ang mga napakasensitibong diskarte gaya ng radioimmunoassay at immunoradiometric assay para sa pagsukat ng mga gamot, tumor marker, at hormone.
Ano ang Radioimmunoassay Assay?
Ang Radioimmunoassay (RIA) ay isang immunoassay na gumagamit ng mga radioactive elements na sunud-sunod na pagbuo ng mga antigen-antibody complex. Ang RIA ay karaniwang gumagamit ng radioactive antibodies upang makita ang dami ng antigen sa isang sample. Ang RIA ay isang napaka-espesipiko at napaka-sensitibong in vitro assay. Ang prinsipyo sa likod ng RIA ay competitive binding. Dito, nakikipagkumpitensya ang isang radioactive antigen laban sa isang non-radioactive antigen para sa pare-parehong dami ng antibody o receptor binding site. Nangangailangan ang RIA ng espesyal na paglilisensya at pag-iingat dahil ginagamit ang mga radioactive substance, at nananatili itong kabilang sa pinakamurang mga diskarte.
Figure 01: Immunoassay
Sa panahon ng RIA, ang isang kilalang dami ng antigen ay madalas na ginagawang radioactive sa pamamagitan ng pag-label dito ng gamma-radioactive isotopes ng iodine na nakakabit sa tyrosine. Pagkatapos ang antigen na ito ay pinagsama sa isang kilalang halaga ng antibody. Dito, ang parehong antigen at antibody ay partikular na nagbubuklod sa isa't isa. Pagkatapos, isang sample ng dugo-serum ay idinagdag upang simulan ang isang mapagkumpitensyang reaksyon sa pagitan ng mga may label na antigen at walang label na mga antigen sa serum na may mga partikular na antibodies. Sa reaksyong ito, ang mga antibodies ay naglalabas ng isang tiyak na halaga ng may label na antigen. Ang dami na ito ay proporsyonal sa ratio ng may label sa walang label na antigen. Sa wakas, nabuo ang isang binding curve para makuha ang dami ng antigen sa blood serum ng isang pasyente.
Ano ang Immunoradiometric Assay?
Ang Immunoradiometric assay (IRMA) ay isang immunoassay na gumagamit ng radiolabeled antibodies. Sa IRMA, ang mga antibodies ay may label na gamit ang radioisotopes. Ang mga antibodies na ito ay nagbubuklod sa mga antigen na nasa isang partikular na sample. Sa isang positibong sample, ang mga antibodies na may radioactive na label ay nagbubuklod sa mga libreng epitope ng antigens. Ito ay bumubuo ng isang antigen-antibody complex.
Sa pangalawang reaksyon, ang mga may label na antibodies na hindi nakatali ay aalisin gamit ang isang solid phase antigen. Ang natitirang bilang ng mga radioactive antibodies sa solusyon ay isang direktang pag-andar ng konsentrasyon ng antigen. Ang IRMA ay kilala bilang isang labis na reagent assay kung saan ang labis na dami ng radiolabeled antibody ay ginagamit bilang reagent. Dito, pinapayagang mag-react ang labis na konsentrasyon ng may label na antibody o antigen. Bilang pangwakas na hakbang, ang antigen-bound at free antibodies ay pinaghihiwalay, at ang antigen bound fraction ay sumasailalim sa radioactive assays. Dito, ang aktibidad ng fraction ay direktang proporsyonal sa konsentrasyon ng antigen.
Ano ang Mga Pagkakatulad sa pagitan ng Radioimmunoassay at Immunoradiometric Assay?
- Ang parehong radioimmunoassay at immunoradiometric assay ay mga immunoassay na gumagamit ng mga radioactive na elemento sa sunud-sunod na pagbuo ng mga antigen-antibody complex.
- Bumubuo sila ng antigen-antibody complex.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng Radioimmunoassay at Immunoradiometric Assay?
Ang Radioimmunoassay ay isang immunoassay na tumutukoy sa mga antas ng antibody sa pamamagitan ng isang antigen na may label na radioisotope habang ang immunoradiometric assay ay isang labis na reagent assay na gumagamit ng labis na konsentrasyon ng radiolabeled na antibody. Kaya, ito ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng radioimmunoassay at immunoradiometric assay. Ang IRMA ay may kakayahang magbigay ng mas mataas na sensitivity kaysa sa RIA. Sa RIA, ang mga antigen ay may label na gamma-radioactive isotopes ng iodine habang sa IRMA antibodies, ay may label na gamit ang isotopes ng iodine. Kaya, ito rin ay isang pagkakaiba sa pagitan ng radioimmunoassay at immunoradiometric assay. Dahil ang IRMA ay isang excess reagent technique, ang assay ay ginagawa sa mas maikling panahon kaysa sa RIA.
Ang sumusunod na talahanayan ay nagbubuod sa mga pagkakaiba sa pagitan ng radioimmunoassay at immunoradiometric assay.
Buod – Radioimmunoassay vs Immunoradiometric Assay
Ang Radioimmunoassay ay isang immunoassay na gumagamit ng mga radioactive na elemento sa sunud-sunod na pagbuo upang matukoy ang mga antas ng antibody. Ang RIA ay karaniwang gumagamit ng radioactive antibodies. Ang isang radioactive antigen ay nakikipagkumpitensya laban sa isang non-radioactive antigen para sa patuloy na dami ng antibody o receptor binding sites. Ang immunoradiometric assay ay isang immunoassay na isinasagawa upang matukoy ang mga antas ng antigen ng isang sample gamit ang radiolabeled antibodies. Ang mga antibodies na ito ay nagbubuklod sa mga antigen na nasa isang partikular na sample. Sa dulo ng bawat assay, nabuo ang isang antigen-antibody complex. Upang makuha ang mga resulta ng mga assay, isang binding curve ang iguguhit. Sa radioimmunoassay, ang may label na dami ng antigen ay proporsyonal sa ratio ng may label sa walang label na antigen, ngunit sa isang immunoradiometric assay, ang aktibidad ng antigen bound fraction ay direktang proporsyonal sa konsentrasyon ng antigen. Ito ang buod ng pagkakaiba sa pagitan ng radioimmunoassay at immunoradiometric assay.
