Mahalagang Pagkakaiba – HPLC vs LCMS
Tingnan muna natin ang kahulugan ng HPLC at LCMS bago suriin ang pagkakaiba ng HPLC at LCMS. Ang Chromatography ay isang pamamaraan ng paghihiwalay sa pagsusuri ng kemikal kung saan ang mga sample na nasasakupan ay pinaghihiwalay sa panahon ng pagpasa sa isang chromatographic medium. Kasama rin dito ang pakikipag-ugnayan sa sample, stationary phase, at mobile phase. Ang HPLC ay kumakatawan sa High Performance Liquid Chromatography, at ginagamit ito bilang isang liquid chromatography na paraan sa analytical chemistry. Ang kumbinasyon ng Liquid Chromatography at Mass Spectroscopy (LCMS) ay binuo para sa quantitative analysis ng mga napiling biomolecules at ito ay isang napaka-sensitibo, tumpak, at tiyak na pamamaraan ng assay kumpara sa HPLC. Ito ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng HPLC at LCMC. Ipakikilala sa iyo ng artikulong ito ang HPLC at LCMC na tumatalakay sa pagsusuri ng kemikal at tinatalakay ang mga pagkakaiba sa pagitan ng HPLC at LCMS.
Ano ang HPLC?
Ang High-performance liquid chromatography (HPLC) ay isang sikat na separation technique sa analytical chemistry. Pangunahing ginagamit ito upang paghiwalayin ang mga bahagi, upang matukoy at mabilang ang bawat bahagi sa isang halo. Mas maaga, ang pamamaraang ito ay kilala bilang high-pressure liquid chromatography dahil umaasa ito sa mga bomba upang dumaloy ang isang may presyon ng likidong solvent na binubuo ng sample mixture sa pamamagitan ng isang column na naka-pack na may solid na adsorbent na materyal. Ang bawat isa at bawat constituent sa sample mixture ay naiiba ang interaksyon sa solid adsorbent material, na nagreresulta sa iba't ibang daloy ng rate para sa iba't ibang constituent. Maaari itong humantong sa paghihiwalay ng mga nasasakupan habang dumadaloy ang mga ito sa column ng HPLC.
HPLC ay ginamit para sa iba't ibang aplikasyon tulad ng pagsusuri ng mga antas ng bitamina D sa dugo, paggamit ng ilegal na droga ng mga atleta sa pamamagitan ng pagtukoy sa mga nalalabi ng gamot sa kanilang ihi, pag-uuri ng mga nasasakupan ng isang kumplikadong biological sample para sa layunin ng pananaliksik at pagsusuri at paggawa ng mga pharmaceutical.
Ano ang LCMS?
Ang Liquid chromatography–mass spectrometry (LCMS) ay isang analytical technique na pinagsasama ang physical separation na kakayahan ng liquid chromatography at ang mass analysis na kakayahan ng mass spectrometry (MS). Ang liquid chromatography ay isang separation technique, at ang mass spectrometry ay ginagamit upang pag-aralan ang mass-to-charge ratio ng mga naka-charge na particle. Ang pisikal na paghihiwalay ay karaniwang nakakamit ng HPLC at bilang kahalili, ang LCMS na kilala rin bilang HPLC-MS. Ang LCMS ay isang nangingibabaw na analytical technique na may napakataas na katumpakan, sensitivity, at specificity kumpara sa HPLC. Kaya, ito ay kapaki-pakinabang sa maraming mga aplikasyon tulad ng mga layunin ng pananaliksik, pagsusuri ng gamot, pagsusuri ng pagkain, atbp. Ang LCMS ay pangunahing ginagamit upang paghiwalayin, upang makita, kilalanin at tumyak ng dami ng mga biochemical na katangian ng isang partikular na sample sa pagkakaroon ng mga kumplikadong pinaghalong kemikal.
Ano ang pagkakaiba ng HPLC at LCMC?
Acronym at kahulugan ng HPLC at LCMC
HPLC: Ang HPLC ay kumakatawan sa High-Performance Liquid Chromatography. Ito ay isang diskarte sa paghihiwalay na pangunahing ginagamit upang paghiwalayin ang mga bahagi, upang matukoy at mabibilang ang bawat bahagi sa isang timpla.
LCMS: Ang LCMS ay nangangahulugang Liquid Chromatography at Mass Spectrometry. Isa itong analytical technique na pinagsasama ang physical separation ability ng liquid chromatography at mass analysis ability ng mass spectrometry (MS).
Mga katangian ng HPLC at LCMC
Pag-uuri
HPLC: Ito ay isang Liquid Chromatography na paraan lamang.
LCMS: Ito ay kumbinasyon ng Liquid Chromatography method at Mass Spectrometry method.
Efficiency
HPLC: Kung ikukumpara sa LCMS, ang pagsusuri ng HPLC ay hindi gaanong mahusay at mas mabagal.
LCMS: Kung ikukumpara sa HPLC, ang pagsusuri sa LCMS ay mahusay at mas mabilis.
Sensitivity
HPLC: Kung ikukumpara sa LCMS, hindi gaanong sensitibo ang pagsusuri sa HPLC.
LCMS: Kung ikukumpara sa HPLC, mas sensitibo ang pagsusuri sa LCMS.
Specificity
HPLC: Kung ikukumpara sa LCMS, hindi gaanong partikular ang pagsusuri ng HPLC.
LCMS: Kung ikukumpara sa HPLC, mas partikular ang pagsusuri sa LCMS.
Katumpakan
HPLC: Nagbibigay ang HPLC ng hindi gaanong tumpak na mga resulta kaysa sa LCMS para sa pagtukoy ng ilang kemikal.
LCMS: Nagbibigay ang LCMS ng mas tumpak na mga resulta kaysa sa HPLC para sa pagtukoy ng ilang kemikal.
Component
HPLC: Maaaring ituring ang HPLC bilang bahagi ng LCMS.
LCMS: Ang LCMS ay hindi maituturing na bahagi ng HPLC.
Ion Source
HPLC: Ang pinagmulan ng ion ay hindi umiiral sa instrumento ng HPLC.
LCMS: Ang pinagmulan ng ion ay nasa instrumento ng LCMS.
Application
HPLC: Maaaring suriin ang mga ions, polymers, organic molecule, at biomolecules gamit ang HPLC.
LCMS: Maaaring suriin ang mga organikong molekula at biomolecule. Sa kaibahan sa HPLC, maaaring gamitin ang LCMS para suriin ang mga hindi kumpletong naresolbang mixture.
Operation
HPLC: Ang diagram ng isang instrumento ng HPLC ay ibinibigay sa figure 1, at karaniwan itong may kasamang autosampler, mga pump, at isang detector. Ipinapasok ng sampler ang sample mixture sa mobile phase (may pressure na timpla ng mga solvent gaya ng tubig, acetonitrile at/o methanol) na naglilipat nito sa column. Ang mga bomba ay naghahatid ng nais na daloy at komposisyon ng mobile phase sa pamamagitan ng column. Ang column ay puno ng adsorbent, na isang butil na solid na particle tulad ng silica o polymers. Ang detektor ay gumagawa ng isang signal na proporsyonal sa dami ng sample na nasa hanay ng presensya sa column, samakatuwid ay nagbibigay-daan para sa quantifiable na pagsusuri ng mga napiling sample na nasasakupan. Ang instrumento ng HPLC ay kinokontrol, at ang pagsusuri ng data ay ibinibigay ng isang digital microprocessor at software ng gumagamit.
Figure 1: Diagram ng HPLC instrument
LCMS: Ang diagram ng instrumento ng LCMS ay ibinigay sa figure 2. Ang sample extract ay ipinasok sa column na binubuo ng HPLC. Ang column na ito ay nagpapanatili ng mga sample na metabolite batay sa mga pisikal na karakter, at iba't ibang metabolite ang dumadaloy sa mass spectrometer sa magkakaibang agwat ng oras. Ang mass spectroscopy ay ginagamit para sa pagtatasa ng mga masa ng mga particle, para sa pagtukoy ng elemental na pag-aayos ng isang molekula, at para sa paglilinaw ng mga istruktura ng molekula. Gayunpaman, ang sample ay dapat na ionized upang makabuo ng mga sisingilin na molekula upang matukoy ang kanilang mass-to-charge ratios. Samakatuwid, sa halip na mga instrumento ng HPLC, ang LCMS ay binubuo ng karagdagang tatlong module tulad ng iron source, mass analyzer, at detector. Maaaring baguhin ng isang pinagmumulan ng ion ang sample ng gas phase sa mga ions at isang mass analyzer na nagpapangkat ng mga ion ayon sa kanilang masa gamit ang mga electromagnetic field. Sa wakas, binibilang ng isang detektor ang mga halaga at naghahatid ng data ng bawat ion na nasa sample. Maaaring gamitin ang LCMS technique para sa parehong qualitative at quantitative application.
Figure 2: Diagram ng LCMS instrument
Sa konklusyon, ang HPLC ay isang liquid chromatography na paraan samantalang ang LCMS ay isang kumbinasyon ng liquid chromatography at mass spectrometry. Parehong may iba't ibang katangian ang mga diskarte sa pagsusuri na ito, ngunit magagamit ang mga ito upang tukuyin at i-quantify ang mga komposisyon ng pagkain, parmasyutiko, at iba pang bioactive molecule.
