Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng HPLC at mabilis na HPLC ay ang pump pressure na ginagamit namin para sa HPLC ay humigit-kumulang 40 MPa samantalang ang pump pressure para sa mabilis na HPLC ay nasa 3-5 MPa.
Ang pinakakaraniwang technique na ginagamit namin para sa paghihiwalay ng mga bahagi ng isang mixture ay ang “liquid chromatography”. Mayroong ilang mga diskarte upang makamit ang layunin kung saan ang HPLC ay napakapopular. Ang HPLC ay kumakatawan sa High Performance Liquid Chromatography na kumikilala, nagbibilang at naghihiwalay ng mga bahagi ng isang likidong pinaghalong sa mabilis at mahusay na paraan. Ang Fast HPLC ay isang espesyal na aplikasyon ng HPLC na kamakailan lamang ay nakakuha ng atensyon ng mga kasangkot sa pag-aaral ng mga solusyon.
Ano ang HPLC?
Ang HPLC ay high performance na liquid chromatography. Gumagamit ito ng mataas na presyon upang itulak ang mga solvent upang dumaan sila sa isang haligi. Gayundin, ito ay isang mainam na paraan upang paghiwalayin at pag-aralan ang iba't ibang mga compound tulad ng mga amino acid, nucleic acid, carbohydrates, steroid, antibiotics at hydrocarbons. Ang HPLC ay may maraming mga pakinabang sa iba pang mga paraan ng paghihiwalay ng mga mixtures tulad ng mas mataas na resolution at mas mabilis na pagsusuri. Tinatanggal nito ang pangangailangan para sa repacking at pagbabagong-buhay at nag-aalok ng mas mahusay na kontrol sa mga parameter at sa gayon, pinapataas ang kahusayan ng paghihiwalay. Sa isip, nababagay ang HPLC para sa mga malalaking aplikasyon dahil maaari nitong paghiwalayin ang napakaliit na particle at pinapayagan ang paggamit ng matataas na presyon na nagpapadali sa mga solvent na dumaloy nang madali.
Figure 01: HPLC Column
Sa madaling sabi, ang paraan ng pagpapatakbo ng pamamaraan ng HPLC ay ang mga sumusunod. Una, dapat nating ipasok ang sample sa stream ng mobile phase sa discrete maliit na halaga gamit ang isang pump. Ang presyon ng bomba ay dapat mapanatili sa 40 MPa. Ang stream na ito ng mobile phase ay lumalabas sa column ng HPLC. Pagkatapos, ang mga bahagi sa sample ay dumaan din sa column. Gayunpaman, ang kanilang mga bilis ng paggalaw ay naiiba sa bawat isa dahil sa pagkakaiba sa mga pakikipag-ugnayan sa pagitan ng mga sample na bahagi at ng adsorbent sa loob ng column. Tinatawag namin itong adsorbent bilang ang nakatigil na yugto dahil ito ay naninirahan sa loob ng haligi (hindi gumagalaw). Pagkatapos, sa dulo ng column, maaari naming kolektahin ang sample na lumalabas mula sa column, sa gayon, maaari naming kolektahin ang mga bahagi sa sample nang hiwalay.
Ano ang Mabilis na HPLC?
Kamakailan, ang mga research scientist sa Schering Plow research institute ay bumuo ng isang mabilis na pamamaraan ng HPLC na isang advanced na bersyon ng HPLC dahil nagbibigay-daan ito para sa mas mabilis na paghihiwalay ng mga compound mula sa isang mixture. Gayundin, na kilala bilang mabilis na HPLC, ang diskarteng ito ay gumagamit ng 2.7um fused core silica particle na ginawa sa pamamagitan ng pagsasama ng 0.5um porous silica sa isang solidong silica particle. Ginagawang napakabilis ng mga katangi-tanging ginawang particle na ito ang pamamaraan ng paghihiwalay at iyon din sa mababang backpressure kaysa sa ginagamit namin sa HPLC.
Figure 02: FPLC Apparatus
Ang Mabilis na HPLC ay nakakakuha ng mga resulta na maihahambing sa UPLC, ngunit itinuturing ng mga siyentipiko na ang diskarteng ito ay mas mahusay dahil hindi ito nangangailangan ng napakamahal na ultrahigh pressure na kagamitan. Ang maganda ay ang mabilis na HPLC ay hindi nangangailangan ng anumang bagong laboratoryo protocol.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng HPLC at Mabilis na HPLC?
Ang HPLC ay high performance na liquid chromatography at ang mabilis na HPLC ay isang advanced na anyo ng high performance na liquid chromatography. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng HPLC at mabilis na HPLC ay ang presyon ng bomba na ginagamit namin para sa HPLC ay nasa paligid ng 40 MPa. Samantalang, ang presyon ng bomba para sa mabilis na HPLC ay nasa paligid ng 3-5 MPa. Higit pa rito, maaari nating paghiwalayin ang iba't ibang compound tulad ng mga amino acid, nucleic acid, carbohydrates, steroid, antibiotic at hydrocarbons gamit ang HPLC technique habang ang mabilis na HPLC technique ay pangunahing ginagamit para sa paghihiwalay ng mga protina.
Ang infographic sa ibaba ay nagpapakita ng higit pang impormasyon sa pagkakaiba ng HPLC at mabilis na HPLC.
Buod – HPLC vs Mabilis na HPLC
Ang HPLC ay isang pamamaraan ng liquid chromatography na naging napakasikat sa buong mundo. Ang Fast HPLC ay isang bagong bersyon ng HPLC, binuo ng mga research scientist sa Schering Plow Institute ang bagong diskarteng ito. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng HPLC at mabilis na HPLC ay nakasalalay sa presyon ng bomba na ginagamit namin para sa paghihiwalay. Yan ay; ang pump pressure na ginagamit namin para sa HPLC ay humigit-kumulang 40 MPa. Ngunit, ang pump pressure para sa mabilis na HPLC ay nasa 3-5 MPa.
