Transformation vs Transfection
Ang Transformation at transfection ay dalawang simpleng pamamaraan na ginagamit upang ipasok ang isang dayuhang gene sa isang host cell. Gayunpaman, nakadepende ang mga diskarteng ito sa uri ng host o vector system.
Ano ang Cell Transformation?
Ang
Transformation ay ang pamamaraan na ginagamit upang ipasok ang mga gene sa yeast at bacterial cells. Ang pamamaraan na ito ay kadalasang nagdudulot ng mga pagbabago sa mga gene, at sa gayon ang pagpapahayag ng gene ay permanente. Ang bacterial transformation ay unang ipinakilala noong 1928 ni Frederick Griffith. Pagkatapos noong unang bahagi ng 1970s, ang pamamaraan na ito ay ginamit sa E.coli. Sa panahon ng proseso ng pagbabagong-anyo ng E. coli, ang mga cell ay binabad sa malamig na solusyon ng CaCl2 Ang hakbang na ito ay ginagawang may kakayahan ang mga selulang E.coli. Pagkatapos nito, ang mga karampatang cell ay halo-halong may plasmid DNA at natupok sa yelo sa loob ng 20-30 min. Pagkatapos ay isang maikling heat shock ay ibinibigay upang paganahin ang paglipat ng DNA sa cell. Sa wakas, ang mga cell ay inilalagay sa isang nutrient na sabaw at incubated sa 37 ° C para sa 60-90 min upang maitatag ang mga plasmids. Kapag ang mga hakbang na ito ay matagumpay na nakumpleto, ang mga nabagong selula ay maaaring ilagay sa isang angkop na media para sa pagpapalaganap ng mga selula. Dahil, ang pagbabago ay itinuturing na isang hindi mahusay na pamamaraan, hindi ito maaaring gamitin para sa paghahanda ng mga clone bank.
Ano ang Cell Transfection?
Ang Transfection ay isang paraan ng pagpapapasok ng isang dayuhang gene, kadalasan, sa mga mammalian cell. Mayroong dalawang paraan ng paglipat; ibig sabihin, transient transfection at stable transfection. Sa lumilipas na paglipat, ang expression ng gene ay magagamit para sa isang limitadong oras; kaya, ang pagbabago ng gene ay nagiging sanhi ng pansamantalang pagpapahayag. Ang paraan ng paglipat na ito ay simple at mabilis; kaya maaari itong gamitin nang regular. Ang isang disbentaha ng lumilipas na paglipat ay ang kahirapan sa pag-apply para sa malalaking sistema ng synthesis ng protina.
Sa panahon ng stable transfection, ang isang target na gene ay isinama sa genome ng host cell, at sa gayon ay permanente ang expression ng gene, hindi katulad ng transient transfection.
Ano ang pagkakaiba ng Transformation at Transfection?
• Ang pagbabago ay ang pagpapapasok ng isang gene sa isang prokaryotic cell (bacterial at yeast), samantalang ang transfection ay karaniwang tinatawag na pagpapapasok ng isang gene sa isang mammalian cell.
• Ang pagbabago ay nagreresulta sa namamanang pagbabago, sa mga gene, samantalang ang paglipat ay maaaring magresulta sa pansamantalang pagpapahayag o permanenteng pagbabago sa mga gene.
