Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng HPLC at UPLC ay ang HPLC ay nagbibigay-daan para sa pagsusuri ng mga particle na may kanilang sukat na humigit-kumulang 5 micrometres samantalang ang UPLC ay nagbibigay-daan para sa mas maliliit na particle sa paligid ng 2 micrometres.
Ang HPLC at UPLC ay parehong Liquid Chromatographic na pamamaraan na kapaki-pakinabang sa paghihiwalay ng mga bahagi ng isang tambalan. Upang malaman ang pagkakaiba ng HPLC at UPLC, kailangan muna nating malaman kung ano ang HPLC. Ito ay dahil ang UPLC ay isang espesyal na bersyon ng HPLC at madali natin itong mauunawaan kung alam natin kung ano ang HPLC.
Ano ang HPLC?
Ang terminong HPLC ay nangangahulugang High Performance Liquid Chromatography. Ito ay isang pamamaraan na maaari nating gamitin upang paghiwalayin ang iba't ibang mga sangkap ng isang tambalan. Gayundin, ito ang pinakamalawak na ginagamit na pamamaraan upang matukoy, mabilang at maghiwalay ng mga bahagi ng isang halo. Bukod, ang pamamaraan na ito ay gumagamit ng isang mataas na presyon upang itulak ang mga solvent sa pamamagitan ng haligi. Bukod dito, ang mga pangunahing aplikasyon ng HPLC ay nasa biochemistry para sa pagsusuri ng mga nasasakupan ng isang tambalan. Ito ay isang mainam na paraan para sa paghihiwalay at pagtukoy ng mga amino acid, nucleic acid, protina, hydrocarbon, pesticides, carbohydrates, antibiotics, steroid at hindi mabilang na iba pang mga inorganic na substance.
Figure 01: HPLC System sa isang Laboratory
Sa madaling sabi, ang paraan ng pagpapatakbo ng pamamaraan ng HPLC ay ang mga sumusunod. Una, dapat nating ipasok ang sample sa stream ng mobile phase sa discrete maliit na halaga gamit ang isang pump. Ang presyon ng bomba ay dapat mapanatili sa 40 MPa. Pagkatapos, ang stream na ito ng mobile phase ay lumalabas sa column ng HPLC. Gayundin, ang mga bahagi sa sample ay dumadaan sa column. Gayunpaman, ang kanilang bilis ng paggalaw ay naiiba sa bawat isa. Ang pagkakaibang ito ay lumitaw dahil sa pagkakaiba sa mga pakikipag-ugnayan sa pagitan ng mga sample na bahagi at ng adsorbent sa loob ng column. Tinatawag namin itong adsorbent bilang ang nakatigil na yugto dahil ito ay naninirahan sa loob ng haligi (hindi gumagalaw). Pangalawa, sa dulo ng column, maaari nating kolektahin ang sample na naglalabas mula sa column. Doon natin matutukoy ang mga pagkakaiba sa mga oras ng pagpapanatili para sa bawat bahagi sa sample.
Ano ang UPLC?
Ang terminong UPLC ay kumakatawan sa Ultra High-Performance Liquid Chromatography. Ito ay isang pagkakaiba-iba ng HPLC, ngunit ang paraan ng pagpapatakbo ay pareho. Gayunpaman, hindi tulad ng HPLC, pinapayagan ng paraang ito ang napakaliit na particle na masuri, gaya ng 2 micrometres na maliliit na particle.
Figure 02: Isang UPLC Device
Bukod dito, nagbibigay ito ng mas mabilis na pagsusuri. Sa diskarteng ito, gumagamit kami ng 100 MPa pump pressure para sa pagpasok ng sample sa column. Samakatuwid, ang mataas na presyon na ito ay nagpapatunay na ang buong sample ay ipinakilala sa column. Kaya, ito ay napakahusay kumpara sa HPLC.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng HPLC at UPLC?
Ang terminong HPLC ay nangangahulugang High Performance Liquid Chromatography samantalang ang terminong UPLC ay nangangahulugang Ultra High Performance Liquid Chromatography. Samakatuwid, ang pamamaraan ng UPLC ay isang binuo na bersyon ng HPLC. Kaya, ang paraan ng operasyon ay pareho para sa parehong mga diskarte. Gayunpaman, ang UPLC ay mas mahusay kumpara sa HPLC dahil gumagamit ito ng mataas na presyon ng bomba; ang pump pressure para sa HPLC ay 40 MPA habang ito ay 100 MPa para sa UPLC. Samakatuwid, ito ay isang pagkakaiba sa pagitan ng HPLC at UPLC. Higit sa lahat, ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng HPLC at UPLC ay ang HPLC ay nagbibigay-daan para sa pagsusuri ng mga particle na may kanilang sukat na humigit-kumulang 5 micrometres samantalang ang UPLC ay nagbibigay-daan para sa mas maliliit na particle sa paligid ng 2 micrometres.
Buod – HPLC vs UPLC
Ang UPLC ay isang anyo ng HPLC. Kaya, ang mga pamamaraan ng operasyon ay pareho. Ngunit, makakahanap tayo ng ilang pinabuting feature sa UPLC kumpara sa HPLC. Samakatuwid, mayroong ilang pagkakaiba sa pagitan ng HPLC at UPLC. Gayunpaman, ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng HPLC at UPLC ay ang HPLC ay nagbibigay-daan para sa pagsusuri ng mga particle na may kanilang sukat na humigit-kumulang 5 micrometres samantalang ang UPLC ay nagbibigay-daan para sa mas maliliit na particle sa paligid ng 2 micrometres.
