Mahalagang Pagkakaiba – Gram Stain kumpara sa Kultura
Ang Gram stain ay isang pamamaraan ng paglamlam na ginagawa upang ibahin ang bacteria sa dalawang grupo ayon sa kapal ng peptidoglycan layer sa kanilang cell wall. Ang kultura ay isang paraan ng paglaki at pagpapanatili ng mga mikroorganismo sa ilalim ng mga kondisyon ng laboratoryo para sa iba't ibang pagsusuri. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng mantsa ng gramo at kultura ay ang kanilang pag-andar; gram strain isang pamamaraan ng paglamlam ng bakterya kung saan ang kultura ay isang paraan ng pagpapalaki at pagpapanatili ng mga mikroorganismo.
Ano ang Gram Stain?
Ang Gram stain ay isang mahalagang differential staining technique na ginagamit para sa bacterial identification sa Microbiology. Ang pamamaraang ito ay ipinakilala ng Danish na Bacteriologist na si Hans Christian Gram noong 1884. Ang paglamlam ng gramo ay kinategorya ang bakterya sa dalawang pangunahing grupo: positibong gramo at negatibong gramo; ang mga ito ay napakahalaga sa bacterial classification at identification. Ginagawa ang gram staining bilang paunang hakbang para sa bacterial characterization.
Ang bacteria ay pinagsama-sama batay sa mga pagkakaiba sa kanilang cell wall. Ang Gram positive bacteria ay naglalaman ng makapal na peptidoglycan layer sa kanilang cell wall habang ang Gram negative bacteria ay naglalaman ng isang manipis na peptidoglycan layer sa kanilang cell wall tulad ng ipinapakita sa figure 01. Ang resulta ng gram staining ay ibabatay sa kapal ng pagkakaiba sa peptidoglycan layer ng cell wall.
Figure 1: Gram positive bacteria at Gram negative bacteria
Ang Grams staining ay ginagawa gamit ang apat na magkakaibang reagents na; pangunahing mantsa, mordant, decolorizing agent at counter stain. Ang crystal violet at safranin ay nagsisilbing primary at counter stains, ayon sa pagkakasunod-sunod habang ang gramo ng iodine at 95% alcohol ay nagsisilbing mordant at decolourizer, ayon sa pagkakabanggit.
Mga Pangunahing Hakbang ng Gram Stain
- Naghahanda ng bacterial smear sa isang malinis na glass slide, inayos ang init at pinalamig.
- Binabahaan ng crystal violet ang pahid sa loob ng 1 – 2 minuto.
- Ang pahid ay hinuhugasan ng mabagal na pag-agos ng tubig mula sa gripo upang alisin ang labis na mantsa.
- Grams iodine ay inilapat sa smear sa loob ng 1 minuto.
- Ang pahid ay hinuhugasan ng mabagal na pagtakbo ng tubig sa gripo
- Ang pahid ay hinuhugasan ng 95% na alkohol sa loob ng 2 – 5 segundo at hinuhugasan ng mabagal na pag-agos ng tubig mula sa gripo.
- Smear ay counter stained na may safranin sa loob ng 1 minuto
- Ang pahid ay hinuhugasan ng mabagal na pag-agos ng tubig mula sa gripo, pinatuyo at inoobserbahan sa ilalim ng mikroskopyo.
Sa dulo ng mantsa ng gramo, ang gramo negatibong bakterya ay makikita sa kulay rosas na kulay habang ang mga gramo na positibong bakterya ay makikita sa kulay ube tulad ng ipinapakita sa Figure 02. Ang kinalabasan ng gramo na mantsa ay napagpasyahan ng kapal ng peptidoglycan layer sa kanilang cell wall. Sa yugto ng pag-decolorize, ang pangunahing mantsa at ang mordant ay madaling maalis mula sa gram-negative bacteria at nagiging walang kulay dahil mayroon silang manipis na peptidoglycan layer. Ang pangunahing mantsa ay nananatili sa mga gramo na positibong bakterya dahil mayroon silang makapal na peptidoglycan layer. Ang counter stain ay hindi magiging epektibo para sa grams positive bacteria dahil sa pagpapanatili ng pangunahing mantsa. Kaya ang mga gramo na positibong bakterya ay makikita sa pangunahing kulay ng mantsa, ibig sabihin, kulay lila. Mabahiran ng counter stain ang gram negative bacteria at makikita sa pick color na kulay ng safranin. Samakatuwid, madaling ikategorya ang bakterya sa dalawang grupo sa pamamagitan ng mantsa ng gramo at ito ay mahalaga sa pagkita ng kaibhan at pagkakakilanlan ng bakterya.
Figure 2: Gram Strain
Ano ang Kultura?
Ang microbial culture ay isang paraan ng pag-kultura at pagpapanatili ng mga microorganism sa ilalim ng mga kondisyon ng laboratoryo para sa iba't ibang layunin. Ang mga kultura ay lumago sa solid, semi-solid at likidong media batay sa uri at layunin ng pag-culture ng microorganism. Ang mga kultura ay binibigyan ng mga kinakailangang sustansya at kondisyon ng paglago na kinakailangan ng mga mikroorganismo. Mayroong iba't ibang bahagi ng isang medium ng kultura gaya ng pinagmumulan ng enerhiya, pinagmumulan ng carbon, pinagmumulan ng nitrogen, mga mineral, micronutrients, tubig, solidifying agent, atbp. Dapat na iakma ang pinakamabuting kalagayan na temperatura, oxygen at pH ayon sa uri ng mikroorganismo na lumaki.
May iba't ibang uri ng microbial culture; halimbawa, batch culture, continuous culture, stab culture, agar plate culture, broth culture, atbp. Ayon sa komposisyon ng lumalaking daluyan, mayroong iba't ibang uri ng kulturang media na kilala bilang synthetic media, semi-synthetic media at natural na media. Ang mga microbial culture ay inihahanda sa ilalim ng sterile na kondisyon sa loob ng isang espesyal na silid na tinatawag na laminar air flow. Ang lumalagong daluyan at ang mga babasagin ay isterilisado bago ang pagbabakuna ng nais na mikroorganismo. Sa ilalim ng wastong sterile na kondisyon, ang target na microorganism ay inililipat sa isterilisadong nutrient medium at incubated sa pinakamabuting kalagayan na temperatura. Sa loob ng daluyan, ang mikroorganismo ay lalago at dadami gamit ang mga ibinigay na sustansya.
Figure 3: Isang bacterial culture sa plato
Ano ang pagkakaiba ng Gram Stain at Culture?
Gram Stain vs Culture |
|
| Ang Grams strain ay isang differential staining technique na ginagamit para sa bacterial differentiation at identification. | Ang microbial culture ay isang paraan ng paglaki ng microorganism sa laboratoryo. |
| Mga Bahagi | |
| Gumagamit ito ng iba't ibang reagents kabilang ang dalawang mantsa. | Gumagamit ito ng iba't ibang culture media gaya ng solid, semi-solid at liquid media na binubuo ng nutrients at iba pang kinakailangang kondisyon. |
| Mga Pangunahing Pag-andar | |
| Ito ay nagbibigay-daan sa pagpapangkat ng bacteria sa dalawang grupo: gramo negatibo at gramo positibo. | Pinapayagan nito ang pagpaparami ng mga microorganism para sa iba't ibang layunin. |
| Base | |
| Gram stain outcome ay batay sa mga pagkakaiba sa peptidoglycan layer ng cell wall. | Lalaki at dadami ang mga microorganism sa loob ng culture media. |
| Kinalabasan | |
| Ang mga gramo na negatibong bakterya ay nakikita sa kulay rosas na kulay at ang mga gramo na positibong bakterya ay nakikita sa kulay na lila. | Sa mga plato, makikita ang mga kolonya ng mga mikroorganismo. Sa likidong media, ang mga mikroorganismo ay nasa suspendido na anyo. |
Buod – Gram Stain vs Culture
Ang mga microbial culture ay inihahanda at pinananatili sa ilalim ng mga kondisyon ng laboratoryo para sa iba't ibang layunin gaya ng pag-iimbak, pagsubok, pagdalisay ng kemikal, atbp. Ang Grams stain ay isang pamamaraan ng paglamlam na nag-iiba ng bacteria sa dalawang pangunahing grupo na tinatawag na grams negative bacteria at grams positive bacteria. Samakatuwid, ang pagkakaiba sa pagitan ng gramo na mantsa at ang kultura ay ang gramo na mantsa ay isang pamamaraan ng paglamlam ng bakterya habang ang kultura ay isang paraan ng pagpapalaki at pagpapanatili ng mga microorganism sa mga laboratoryo.
