Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng ion exchange at size exclusion chromatography ay ang ion exchange chromatography ay ginagamit upang suriin ang mga ionic substance ayon sa singil samantalang ang size exclusion chromatography ay ginagamit upang suriin ang malalaking molekula ayon sa laki.
Ang Chromatography ay isang analytical technique na maaaring gamitin para pag-aralan ang iba't ibang mixture. Ang mga chromatographic technique ay pinangalanan ayon sa parameter na ginamit para pag-aralan ang mga substance – hal. size exclusion chromatography, ion exchange chromatography, atbp.
Ano ang Ion Exchange Chromatography?
Ang Ion exchange chromatography ay isang analytical technique kung saan masusuri natin ang mga ionic substance. Madalas na kapaki-pakinabang ang pag-analisa ng mga inorganic na anion at cation (i.e. chloride at nitrate anions at potassium, sodium cations). Bagama't hindi ito isang pangkaraniwang pamamaraan, maaari nating pag-aralan ang mga organikong ion gamit ito. Bukod dito, maaari nating gamitin ang pamamaraang ito para sa paglilinis ng mga protina dahil ang mga protina ay sinisingil ng mga molekula sa ilang mga halaga ng pH. Dito, gumagamit kami ng solidong nakatigil na yugto kung saan maaaring ilakip ang mga sisingilin na particle. Halimbawa, maaari nating gamitin ang resin polystyrene-divinylbenzene copolymers bilang solidong suporta.
Figure 01: Teorya sa likod ng Ion Exchange Chromatography
Upang ipaliwanag pa ito, ang nakatigil na yugto ay may mga nakapirming ion gaya ng mga sulfate anion o quaternary amine cations. Ang bawat isa sa mga ito ay dapat na nauugnay sa isang counter ion (isang ion na may kabaligtaran na singil) kung gusto nating panatilihin ang neutralidad ng sistemang ito. Kung ang counter ion ay isang cation, pinangalanan namin ang system bilang isang cation exchange resin. Ngunit, kung ang counterion ay isang anion, ang sistema ay isang anion exchange resin. Bukod dito, mayroong limang pangunahing hakbang sa chromatography ng pagpapalitan ng ion:
- Initial stage
- Adsorption ng target
- Pagsisimula ng elution
- Pagtatapos ng elution
- Regeneration
Ano ang Size Exclusion Chromatography?
Ang Size exclusion chromatography o SEC ay isang analytical technique kung saan ang mga molecule sa isang mixture ay maaaring paghiwalayin ng kanilang laki at molecule weight. Karaniwan, ito ay gumagana sa malalaking molekula na tinatawag na macromolecules. Karaniwan, ang isang may tubig na solusyon ay ginagamit para sa pagsusuri. Pagkatapos ito ay tinatawag na gel filtration chromatography. Kapag organic solvent, tinatawag itong gel permeation chromatography.
Ang Gel filtration chromatography ay isang anyo ng size exclusion chromatography kung saan gumagamit kami ng aqueous solution bilang mobile phase. Samakatuwid, ang mobile phase na madalas nating ginagamit sa diskarteng ito ay isang aqueous buffer. Gayundin, gumagamit kami ng isang chromatographic column para sa paghihiwalay na ito, at kailangan naming i-pack ang column na may mga porous na kuwintas. Karaniwan, ang Sephadex at agarose ay kapaki-pakinabang bilang porous na materyal. Samakatuwid, ang mga materyal na ito ay ang nakatigil na yugto ng aming eksperimento. Bukod dito, maaari nating gamitin ang laki ng butas ng mga butil na ito upang matukoy ang laki ng mga macromolecule na ating pinaghihiwalay. Gayunpaman, ito ay isang pagtatantya lamang.
Figure 02: Isang Apparatus para sa Size Exclusion Chromatography
Ang Gel permeation chromatography ay isang anyo ng size exclusion chromatography kung saan gumagamit kami ng organic solvent bilang mobile phase. Samakatuwid, maaari tayong gumamit ng mga solusyon tulad ng hexane at toluene para sa layuning ito. Ang nakatigil na yugto ay isang porous na materyal, katulad ng sa gel filtration chromatography. Ang pamamaraan na ito ay madalas na inilalapat sa mga polimer at iba pang materyal na natutunaw sa organiko. Ang paraan ng pagkilos ng technique ay katulad ng sa gel filtration chromatography.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng Ion Exchange at Size Exclusion Chromatography?
Ang Chromatography ay isang analytical technique na maaaring gamitin para pag-aralan ang iba't ibang mixture. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng ion exchange at size exclusion chromatography ay ang ion exchange chromatography ay ginagamit upang pag-aralan ang mga ionic substance ayon sa singil samantalang ang size exclusion chromatography ay ginagamit upang suriin ang malalaking molekula ayon sa laki.
Sa ibaba ng infographic ay nagbibigay ng higit pang impormasyon tungkol sa pagkakaiba sa pagitan ng ion exchange at size exclusion chromatography.
Buod – Ion Exchange vs Size Exclusion Chromatography
Ang Chromatography ay isang analytical technique na maaaring gamitin para pag-aralan ang iba't ibang mixture. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng ion exchange at size exclusion chromatography ay ang ion exchange chromatography ay ginagamit upang pag-aralan ang mga ionic substance ayon sa singil samantalang ang size exclusion chromatography ay ginagamit upang suriin ang malalaking molekula ayon sa laki.