Mahalagang Pagkakaiba – Gram Stain vs Acid Fast
Ang bacteria ay napakaliit na microorganism. Ang mga ito ay transparent, at ang kanilang pagtuklas ay mahirap sa ilalim ng pamumuhay at walang bahid na mga kondisyon. Kaya, ang iba't ibang paraan ng paglamlam ay binuo upang mapadali ang pagtuklas ng bacterial. Mayroong tatlong pangunahing uri ng mga diskarte sa paglamlam: simpleng paglamlam, paglamlam ng kaugalian, at paglamlam ng istruktura. Ang differential staining ay isang pamamaraan na gumagamit ng higit sa isang mantsa upang maiiba ang bacteria. Ang Gram stain at acid-fast stain ay pinakasikat na kilala bilang differential stains. Ang Gram staining ay isang differential staining technique, na naghihiwalay sa bacteria sa dalawang grupo na kilala bilang Gram-positive bacteria at Gram-negative bacteria. Ang acid-fast stain ay isang differential stain na ginagamit upang matukoy ang acid-fast na organismo gaya ng Mycobacterium mula sa mga non-acid fast na organismo. Ito ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng Gram stain at Acid Fast stain.
Ano ang Gram Stain?
Ang Gram stain ay isang mahalagang differential staining technique na ginagamit para sa bacterial identification sa microbiology. Ang pamamaraan na ito ay ipinakilala ng Danish Bacteriologist na si Hans Christian Gram noong 1884. Ang paglamlam ng gramo ay kinategorya ang bakterya sa dalawang pangunahing grupo na pinangalanang gramo positibo at gramo negatibo, na napakahalaga sa pag-uuri at pagkakakilanlan ng bakterya. Ang mga microbiologist ay nagsasagawa ng gram staining bilang paunang hakbang sa bacterial characterization sa kanilang pag-aaral.
Ang bacteria ay pinagsama-sama batay sa mga pagkakaiba sa kanilang cell wall. Ang gram positive bacteria ay binubuo ng isang makapal na peptidoglycan layer sa kanilang cell wall habang ang gram negative bacteria ay binubuo ng isang manipis na peptidoglycan layer sa kanilang cell wall. Ang kalalabasan ng paglamlam ng gramo ay ibabatay sa pagkakaiba sa kapal ng peptidoglycan layer ng cell wall.
Ang Grams staining ay ginagawa gamit ang apat na magkakaibang reagents na; pangunahing mantsa, mordant, decolorizing agent at counter stain. Ang kristal na violet at safranin ay ginagamit bilang pangunahin at counter stain, ayon sa pagkakasunod-sunod habang ang gramo ng yodo at 95% na alkohol ay ginagamit bilang mordant at decolourizer, ayon sa pagkakabanggit. Ang mga pangunahing hakbang ng paglamlam ng gramo ay ang mga sumusunod;
- Naghahanda ng bacterial smear sa isang malinis na glass slide, inayos ang init at pinalamig.
- Binabahaan ng crystal violet ang pahid sa loob ng 1 – 2 minuto.
- Ang pahid ay hinuhugasan ng mabagal na pag-agos ng tubig mula sa gripo upang alisin ang labis na mantsa.
- Grams iodine ay inilapat sa smear sa loob ng 1 minuto.
- Ang pahid ay hinuhugasan ng mabagal na pagtakbo ng tubig sa gripo
- Ang pahid ay hinuhugasan ng 95% na alkohol sa loob ng 2 – 5 segundo at hinuhugasan ng mabagal na pag-agos ng tubig mula sa gripo.
- Smear ay counter stained na may safranin sa loob ng 1 minuto
- Ang pahid ay hinuhugasan ng mabagal na pag-agos ng tubig mula sa gripo, pinatuyo at inoobserbahan sa ilalim ng mikroskopyo.
Sa dulo ng mantsa ng gramo, makikita ang gram-negative bacteria sa kulay rosas na kulay habang ang gramo-positive bacteria ay makikita sa kulay purple.
Figure 01: Gram negative at Gram positive bacteria
Ang kinalabasan ng mantsa ng gramo ay napagpasyahan ng kapal ng peptidoglycan layer sa kanilang cell wall. Sa panahon ng decolorizing step, ang pangunahing mantsa at ang mordant ay madaling maalis mula sa gram-negative bacteria at nagiging walang kulay dahil mayroon silang manipis na peptidoglycan layer. Ang pangunahing mantsa ay nananatili sa gram-positive bacteria dahil mayroon silang makapal na peptidoglycan layer. Ang counter stain ay hindi magiging epektibo para sa gram positive bacteria dahil sa pagpapanatili ng pangunahing mantsa. Kaya, ang mga gramo na positibong bakterya ay makikita sa pangunahing kulay ng mantsa, iyon ay, kulay lila. Ang counter stain ay mabahiran ang gram negative bacteria, at makikita ang mga ito sa pick color, na siyang safranin color. Kaya naman, madaling ikategorya ang bacteria sa dalawang grupo ayon sa gram stain at ito ay mahalaga sa bacterial differentiation at identification.
Ano ang Acid Fast?
Ang Acid-fastness ay isang pisikal na katangian ng ilang partikular na bacteria, partikular ang resistensya ng mga ito sa decolorization ng mga acid sa panahon ng mga pamamaraan ng paglamlam. Kapag nabahiran na, lumalaban ang mga organismong ito sa dilute acid at o ethanol based na mga pamamaraan ng decolorization na karaniwan sa maraming protocol ng paglamlam. Kaya, ang pangalang 'acid fast' ay ibinigay sa mga organismong iyon. Ang katangiang ito ay ipinapakita dahil sa pagkakaroon ng mataas na antas ng waxy material (mycolic acids) sa kanilang mga cell wall. Ang pagsusulit na ito ay kritikal para sa pagtukoy ng Mycobacterium tuberculosis.
Figure 2: Acid Fast Mycobacteria
Ang acid fast stain na ito ay binuo ni Paul Ehrlich noong 1882. Ang acid fast technique ng Ehrlich ay binago ni Ziehl-Neelsen at mas madalas na itong ginagamit. Ang proseso ng acid fast staining ay nagsasangkot ng tatlong magkakaibang reagents. Ang carbol fuschin ay ginagamit bilang pangunahing mantsa. Ang acid na alkohol ay ginagamit bilang ahente ng dekolor. Ginagamit ang Methylene Blue bilang counter stain. Ang pamamaraan ng paglamlam ay isinasagawa bilang mga sumusunod.
- Ang pangunahing mantsa (carbol fuchsin) ay inilapat sa nakapirming specimen sa slide (Lahat ng mga cell ay mabahiran ng pulang kulay).
- Ang slide ay pinainit sa pamamagitan ng pagpapasingaw ng 5 minuto, na nagtutulak ng mga mantsa sa mga cell nang maayos.
- Pagkatapos ay idinagdag ang decolorizing solution (Aalisin nito ang pulang tina sa lahat ng cell maliban sa acid fast bacteria).
- Methylene blue ay idinagdag bilang counter stain (Kinukulayan nito ang lahat ng decolorized bacterial cell).
- Ang acid fast bacteria ay nananatiling pula habang ang nonacid fast bacteria ay nabahiran ng asul.
Ano ang Pagkakatulad sa pagitan ng Gram Stain at Acid Fast?
- Ang Gram stain at Acid fast ay dalawang differential staining technique.
- Ang parehong mga diskarte ay ikinategorya ang bakterya sa dalawang grupo.
- Ang parehong mga diskarte ay gumagamit ng dalawang mantsa at isang decolourizing.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng Gram Stain at Acid Fast?
Gram Stain vs Acid Fast |
|
| Ang Gram staining ay isang differential staining technique, na naghihiwalay sa bacteria sa dalawang grupong Gram-positive bacteria at Gram-negative bacteria. | Ang Acid Fast stain ay isang differential stain na ginagamit upang makilala ang acid-fast na organismo mula sa non acid fast organism. |
| Pangunahing Mantsa | |
| Crystal violet ang karaniwang ginagamit na pangunahing mantsa sa gram staining. | Carbol fuchsin ang pangunahing mantsa na ginagamit sa acid fast. |
| Decolourizing Agent | |
| 95% alcohol ang ginagamit bilang decolourizing agent sa gram stain. | Ang acid na alkohol ay ginagamit bilang isang decolourizing agent sa acid fast. |
| Counter Stain | |
| Gram stain ay gumagamit ng safranin bilang counter stain. | Ang acid fast stain ay gumagamit ng methylene blue bilang counter stain. |
| Pagmamasid | |
| Ang gram-negative bacteria ay sinusunod sa pick color at ang grams positive bacteria ay nakikita sa purple na kulay. | Ang Acid Fast bacteria ay nakikita sa pulang kulay at hindi acid fast bacteria ay nakikita sa asul na kulay. |
Buod – Gram Stain vs Acid Fast
Mahirap ang visualization ng mga microorganism sa estado ng buhay. Samakatuwid, ang mga biological stain at mga pamamaraan ng paglamlam ay malawakang ginagamit upang pag-aralan ang kanilang mga katangian. Ang differential staining ay isang uri ng pamamaraan ng paglamlam na ginagamit upang makilala ang bacteria. Ang Gram stain at acid fast stain ay dalawang differential staining techniques. Ang paglamlam ng gramo ay nag-iiba ng gram-negative bacteria at gram-positive bacteria batay sa kapal ng kanilang mga cell wall. Ang acid fast staining ay nag-iiba ng acid fast bacteria mula sa non acid fast bacteria batay sa mycolic acid content sa cell wall. Ito ang pagkakaiba sa pagitan ng acid fast at gram stain.
I-download ang PDF na Bersyon ng Gram Stain vs Acid Fast
Maaari mong i-download ang PDF na bersyon ng artikulong ito at gamitin ito para sa mga offline na layunin ayon sa tala ng pagsipi. Paki-download ang bersyon ng PDF dito Pagkakaiba sa pagitan ng Gram Stain at Acid Fast.
