Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng competitive at noncompetitive na ELISA ay ang competitive na ELISA ay gumagamit ng inhibition antigen habang ang non competitive ELISA ay hindi gumagamit ng inhibition antigen para sa assay.
Ang Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) ay isang immunological assay na tumutuklas ng iba't ibang target gaya ng antibodies, antigens, proteins, at glycoproteins. Ito ay isang mabilis at simpleng paraan upang maisagawa. Samakatuwid, mas madalas itong ginagamit para sa mga layunin ng pananaliksik at diagnostic. Kasama sa ELISA ang paggamit ng mga enzyme at ang tiyak na pagbubuklod ng antibody at antigen. Batay sa kung paano nangyayari ang mga reaksyon, mayroong apat na uri ng ELISA: direktang ELISA, hindi direktang ELISA, sandwich ELISA, at inhibition ELISA. Ang direktang, hindi direkta at sandwich na ELISA ay mga uri ng hindi mapagkumpitensyang ELISA habang ang inhibition na ELISA ay isang uri ng kumpletong ELISA. Ang pangunahing layunin ng artikulong ito ay talakayin ang pagkakaiba sa pagitan ng mapagkumpitensya at hindi mapagkumpitensyang ELISA.
Ano ang Competitive ELISA?
Competitive ELISA ay sumusukat sa antigen concentration sa isang sample sa pamamagitan ng pagtuklas ng signal interference. Dito, ang assay ay gumagamit ng isang inhibitor antigen. Samakatuwid, ito ay isang uri ng pagsugpo sa ELISA. Sa panahon ng pamamaraang ito, ang mga antigen na naroroon sa sample ay nakikipagkumpitensya sa napiling reference na antigen para sa pagbubuklod sa isang tiyak na halaga ng may label na antibody. Higit pa rito, ang pamamaraang ito ay nagsisimula sa pagpapapisa ng sample, na may labis na dami ng may label na antibody. Gayundin, ang reference na antigen ay dapat na pre-coated sa isang multiple well assay plate. Pagkatapos ang sample mixture ay dapat idagdag sa assay plate na naglalaman ng reference na antigen. Ang mga libreng antibodies ay magbibigkis sa reference na antigen depende sa dami ng antigen sa sample. Samakatuwid, kung mas maraming sample na antigen ang naroroon, mas kaunting reference na antigen ang makikita. Kaya, lumilikha ito ng mas mahinang signal.
Figure 01: ELISA
Sa kabaligtaran, kapag ang sample ay naglalaman ng mas kaunting halaga ng antigen, parami nang parami ang reference na antigen na sasakupin ang mga antibodies at magbibigay ng malakas na signal. Dahil ang mapagkumpitensyang ELISA ay nagbibigay ng mas malakas na signal kapag ang sample ay naglalaman ng mababang halaga ng mga antigen, ang mapagkumpitensyang ELISA ay isang napakasensitibong pagsusuri, kahit na para sa mga sample na may maliit na bilang ng mga antigen.
Sa ilang mapagkumpitensyang ELISA kit, isang may label na antigen ang ginagamit sa halip na isang may label na antibody. Dito, ang may label na antigen at ang sample na antigen ay makikipagkumpitensya para sa pagbubuklod sa pangunahing antibody. Katulad nito, kapag ang dami ng antigen sa sample ay mababa, ang dami ng may label na antigen na nagbubuklod sa mga antibodies ay magiging mas mataas at lilikha ng mas malakas na signal.
Ano ang Noncompetitive ELISA?
Sa apat na uri ng ELISA, tatlong uri ang hindi mapagkumpitensyang ELISA. Ang mga ito ay direktang ELISA, hindi direktang ELISA, at sandwich ELISA. Gumagana ang lahat ng tatlong format sa ilalim ng karaniwang prinsipyo ng ELISA na may kaunting pagkakaiba sa kanilang mga pamamaraan.
Direct ELISA ay gumagamit ng enzyme na may label na pangunahing antibody. Samakatuwid, hindi ito nangangailangan ng pangalawang antibody. Samakatuwid, ang direktang ELISA ay mas mabilis kaysa sa iba pang uri ng ELISA. Ang pangunahing antibody ay direktang magbibigkis sa immobilized target antigen na naroroon sa plato. Kaya naman, magaganap ang reaksyon ng enzyme-substrate, na magbubunga ng nakikitang signal.
Figure 02: Sandwich ELISA
Hindi tulad ng direktang ELISA, ang hindi direktang ELISA ay gumagamit ng walang label na pangunahing antibody at isang enzyme na may label na pangalawang antibody. Kapag ang pangunahing antibody ay nagbubuklod sa immobilized antigen, ang pangalawang antibody ay nagbubuklod sa pangunahing antibody. Ang enzyme sa pangalawang antibody ay tutugon sa antigen at gagawa ng nakikitang signal. Ang Sandwich ELISA ay iba sa direkta at hindi direktang ELISA. Dito, hindi kumikilos ang antibody sa dingding ng assay plate.
Ano ang Mga Pagkakatulad sa pagitan ng Competitive at Noncompetitive ELISA?
- Competitive at noncompetitive ELISA ay dalawang uri ng immunosorbent assay techniques.
- Ang mga ito ay lubos na nababaluktot at sensitibong mga diskarte.
- Higit pa rito, parehong mapagkumpitensya at hindi mapagkumpitensya ang ELISA ay enzyme-linked immunoassays.
- Gayundin, ang parehong paraan ay bumubuo ng signal dahil sa reaksyon ng enzyme-substrate.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng Competitive at Noncompetitive ELISA?
Ang Competitive ELISA ay isang uri ng ELISA na umaasa sa pagkumpleto sa pagitan ng analyte antigen at may label na antigen para sa limitadong halaga ng partikular na antibody. Sa kabilang banda, walang ganoong kumpetisyon na umiiral sa pagitan ng antigen ng interes at sanggunian na antigen sa hindi mapagkumpitensyang ELISA. Kaya, ito ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng mapagkumpitensya at hindi mapagkumpitensyang ELISA. Katulad nito, ang competitive na ELISA ay isang inhibition ELISA habang ang noncompetitive ELISA ay hindi isang inhibition ELISA. Kaya, isa rin itong pagkakaiba sa pagitan ng mapagkumpitensya at hindi mapagkumpitensyang ELISA.
Bukod dito, ang mapagkumpitensyang ELISA ay mas angkop para sukatin ang mababang halaga ng antigen na interes. Ito ay isang sensitibong pamamaraan. Sa kabilang banda, ang hindi mapagkumpitensyang ELISA ay hindi nakasalalay sa bilang ng mga antigen na naroroon sa isang sample. Samakatuwid, isa rin itong pagkakaiba sa pagitan ng mapagkumpitensya at hindi mapagkumpitensyang ELISA.
Ipinapaliwanag ng infographic sa ibaba ang pagkakaiba sa pagitan ng mapagkumpitensya at hindi mapagkumpitensyang ELISA nang magkatulad.
Buod – Competitive vs Noncompetitive ELISA
Competitive at noncompetitive ELISA ay ang dalawang pangunahing uri ng ELISA o enzyme-linked immunosorbent assays. Sa pagbubuod ng pagkakaiba sa pagitan ng mapagkumpitensya at hindi mapagkumpitensyang ELISA, ang mapagkumpitensyang ELISA ay umaasa sa kumpetisyon sa pagitan ng antigen ng interes at reference na antigen patungo sa limitadong halaga ng mga antibodies. Samakatuwid, ang mapagkumpitensyang ELISA ay pinangalanan din bilang inhibition ELISA. Sa kabilang banda, ang hindi mapagkumpitensyang ELISA ay hindi umaasa sa kumpetisyon sa pagitan ng mga target na antigen at reference na antigens. Gumagamit ito ng labis na may label na tiyak na antibody patungo sa analyte ng interes. Kaya, ito ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng mapagkumpitensya at hindi mapagkumpitensyang ELISA. Ang direktang ELISA, hindi direktang ELISA, at sandwich ELISA ay ang tatlong pangunahing uri ng hindi mapagkumpitensyang ELISA.
