Mahalagang Pagkakaiba – TLC vs HPTLC
Ang TLC at HPTLC ay dalawang kemikal na pamamaraan na ginagamit upang paghiwalayin ang mga non-volatile na bahagi sa isang timpla. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng TLC at HPTLC ay ang absorbent material sa TLC plate ay may malalaking particle samantalang ang HPTLC plates ay may napakaliit na particle ng adsorbent material.
Ang TLC ay thin layer chromatography. Ang HPTLC ay high-performance thin layer chromatography, na isang advanced na technique kung ihahambing sa TLC method.
Ano ang TLC?
Ang TLC o thin layer chromatography ay isang basic chemical technique na ginagamit upang paghiwalayin ang mga non-volatile na bahagi sa isang mixture. Ang eksperimentong ito ay isinasagawa gamit ang mga sheet ng salamin, plastik o papel. Ang sheet na ito ay pinahiran ng isang manipis na layer ng selulusa o silica gel (isang adsorbent na materyal). Ang manipis na layer na ito ay kilala bilang ang nakatigil na yugto ng TLC. Kilala ang sheet bilang TLC plate.
Bago ang eksperimento, ang baseline at topline ay minarkahan ng lapis sa TLC plate. Pagkatapos ay makikita ang sample sa linyang ito gamit ang isang capillary tube. Pagkatapos nito, ang TLC plate ay inilalagay nang patayo sa isang mobile phase. Ang mobile phase ay isang solvent (o isang pinaghalong solvents) na inilagay sa isang lalagyan. Kapag inilalagay ang TLC plate sa mobile phase na ito, dapat panatilihin ng isa ang baseline sa margin ng solvent. Kung hindi, ang sample ay matutunaw sa solvent.
Ang TLC plate ay pinapayagang manatili sa mobile phase nang ilang panahon. Pagkatapos, sa paglipas ng panahon, ang mobile phase ay tumataas pataas sa plato dahil sa pagkilos ng capillary. Kung matutunaw ang sample sa mobile phase, tataas ito pataas kasama ng mobile phase.
Ang prinsipyong “like dissolves like” ay nasa likod ng pamamaraang ito ng TLC. Nangangahulugan ito na ang mga polar compound ay natutunaw sa mga polar solvents samantalang ang mga nonpolar compound ay natutunaw sa mga nonpolar solvents. Ang nakatigil na yugto ay kadalasang silica gel o selulusa, na isang polar compound. Ang mobile phase na ginamit ay isang nonpolar solvent tulad ng hexane. Samakatuwid, kung ang sample ay naglalaman ng anumang nonpolar na bahagi, ang mga bahaging ito ay lilipat paitaas kasama ng mobile phase. Ang mga polar na bahagi ay mananatili sa plato. Sa mga gumagalaw na bahagi, ang mga katamtamang nonpolar compound ay mabagal na lilipat samantalang ang mga high nonpolar compound ay mabilis na lilipat. Kapag naabot na ng solvent front ang tuktok na linya ng TLC plate, ang plato ay aalisin at hayaang matuyo.
Figure 01: TLC Technique
Kung ang mga bahagi sa sample ay may kulay na mga compound, dapat may mga makukulay na spot sa plato sa iba't ibang lokasyon. Ngunit kung ang mga bahagi ay walang kulay, ang ilang iba pang mga pamamaraan ay dapat gamitin; halimbawa, pag-spray ng ninhydrin para makita ang ammonia o mga amine (pangunahing amine at pangalawang amine).
Ano ang HPTLC?
Ang HPTLC o high performance thin layer chromatography ay ang advanced na anyo ng thin layer chromatography (TLC). Ang resolution at ang katumpakan ng HPTLC ay napakataas. Karamihan sa mga hakbang ng diskarteng ito ay maaaring i-automate.
Ang mga plate na ginamit sa HPTLC ay naglalaman ng mga particle ng silica gel na may napakaliit na sukat at ang densidad ng packing ng gel sa plato ay mataas. Ang ibabaw ng plato ay makinis at nagbibigay ng mahusay na paghihiwalay. Ang pagsusuri ay mas mabilis kaysa sa pamamaraan ng TLC. Ang sensitivity ng pamamaraang ito ay mataas din. Sa HPTLC, maraming iba't ibang sample ang maaaring paghiwalayin sa iisang plato nang walang anumang hakbang sa paghahanda ng sample.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng TLC at HPTLC?
TLC vs HPTLC |
|
| Ang TLC ay thin layer chromatography. | Ang HPTLC ay high performance thin layer chromatography. |
| Technique | |
| Ito ay isang pangunahing kemikal na pamamaraan na ginagamit upang paghiwalayin ang mga non-volatile na bahagi sa isang timpla. | Ito ang advanced na anyo ng thin layer chromatography (TLC). |
| Plate | |
| Ang TLC plate ay maaaring gawa sa papel, plastik o salamin na nilagyan ng adsorbent na materyal na may malalaking particle. | Ang mga plato ng HPTLC ay may napakaliit na particle ng adsorbent material. |
| Resolution | |
| Ang TLC method ay nagbibigay ng mahinang resolution kapag ang sample ay may mga bahaging may katulad na katangian. | Ang HPTLC method ay nagbibigay ng mataas na resolution. |
| Oras | |
| Ang TLC technique ay isang diskarteng nakakaubos ng oras. | Ang HPTLC ay nagbibigay ng mga resulta sa mas mataas na bilis kaysa sa pamamaraan ng TLC. |
Buod – TLC vs HPTLC
Ang HPTLC ay ang advanced na anyo ng TLC. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng TLC at HPTLC ay ang TLC plate ay maaaring gawa sa papel, plastik o salamin na nilagyan ng adsorbent material na may malalaking particle samantalang ang HPTLC plates ay may napakaliit na particle ng adsorbent material.
