Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng BL21 at DH5 Alpha ay ang BL21 ay isang protease deficient genetically engineered competent E. coli cell na pangunahing ginagamit para sa pagpapahayag ng protina, habang ang DH5 Alpha ay isang genetically engineered na karampatang E. coli cell na may recA1 mutation na pangunahing ginagamit para sa plasmid transformation.
E. coli ay isa sa mga sikat na organismo na pinili para sa recombinant na produksyon ng protina. Ito ay naging pinakasikat na platform ng pagpapahayag sa mga nakaraang taon. Ginagamit din ito bilang pabrika ng cell. Ang BL21 at DH5 Alpha ay dalawang genetically engineered na E. coli cells na kasalukuyang ginagamit para sa pagpapahayag ng protina at pagbabagong-anyo ng plasmid, ayon sa pagkakabanggit.
Ano ang BL21?
Ang BL21 ay isang protease deficient genetically engineered competent E.coli cell na pangunahing ginagamit para sa pagpapahayag ng protina. Ang E. coli BL21 ay isang bacterial cell na nagmula sa B strain. Mayroon itong mga depekto ng Lon protease at ompT outer membrane protease. Ito ay karaniwang ginagamit para sa recombinant na pagpapahayag ng protina dahil karaniwan itong nagdudulot ng katatagan sa mga ipinahayag na protina. Ang BL21 ay kapaki-pakinabang para sa pagpapahayag ng protina na may pCold I-IV DNA at pCold TF DNA. Ngunit ang karampatang E. coli cell na ito ay hindi inilaan para sa isang sistema ng pagpapahayag ng protina gamit ang T7 promoter tulad ng pET system. Ang dahilan sa likod nito ay ang BL21 ay hindi nagpapahayag ng T7 RNA polymerase. Bukod pa rito, hindi inirerekomenda na gamitin para sa pagbuo o paghahanda ng plasmid dahil wala itong recA mutation.
Figure 01: BL21
Ang BL21 ay unang inilarawan ni Studier noong 1986 pagkatapos ng iba't ibang pagbabago ng B line. Ang mga selula ng BL21 ay kulang sa LON protease, na nagpapababa ng maraming mga dayuhang protina. Higit pa rito, nawawala ang isa pang gene na nagko-code para sa outer membrane protease (OmpT) na ang function ay upang pababain ang extracellular proteins. Ang kakulangan ng mga protinang ito ay nagpapalitaw ng matagumpay na paggawa ng dayuhang protina sa mga selulang E. coli BL21. Higit pa rito, pinipigilan ng hsdSB mutation sa mga cell na ito ang dayuhang DNA methylation at pagkagambala sa mga BL21 cells.
Ano ang DH5 Alpha?
Ang DH5 Alpha ay isang genetically engineered na karampatang E. coli cell na may recA1 mutation na pangunahing ginagamit para sa plasmid transformation. Ang mga selulang DH5 Alpha E. coli ay genetically engineered ng American biologist na si Douglas Hanahan upang mapakinabangan ang kahusayan ng pagbabago. Ang DH5 Alpha cell ay may tatlong natatanging mutasyon: recA1, endA1, at lacZΔM15. Ang recA1 ay isang solong point mutation na pumapalit sa glycine 160 at isang aspartic acid residue sa recA polypeptide. Ang mutation na ito ay hindi pinapagana ang aktibidad ng mga recombinases at inactivate ang homologous recombination. Inactivate ng endA1 mutation ang isang intracellular endonuclease na pumipigil dito na sirain ang ipinasok na plasmid.
Figure 02: DH5 Alpha
Higit pa rito, ang lacZΔM15 mutation ay nagbibigay-daan sa blue-white screening ng mga nabagong cell. Ang mga cell na ito ay karampatang mga cell. Ang mga ito ay madalas na ginagamit sa pagbabago ng calcium chloride upang ipasok ang nais na plasmid. Natukoy ng kamakailang pananaliksik na ang DH5 Alpha cell na may pamamaraang Hanahan ay ang pinaka mahusay na karampatang cell para sa pagbabagong-anyo ng plasmid.
Ano ang Pagkakatulad sa pagitan ng BL21 at DH5 Alpha?
- Ang BL21 at DH5 Alpha ay dalawang genetically engineered na E.coli
- Parehong may kakayahang mga cell.
- Binubuo ang mga ito ng mga natatanging mutasyon.
- Parehong walang natural na tirahan.
- Ginagamit ang mga ito para sa mga layuning pang-laboratoryo gaya ng mga pag-aaral sa ekspresyon at mga pamamaraan sa pag-clone.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng BL21 at DH5 Alpha?
Ang BL21 ay isang protease deficient genetically engineered competent E. coli cell na pangunahing ginagamit para sa pagpapahayag ng protina. Sa kabilang banda, ang DH5 Alpha ay isang genetically engineered na karampatang E. coli cell na may recA1 mutation na pangunahing ginagamit para sa plasmid transformation. Kaya, ito ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng BL21 at DH5 Alpha. Higit pa rito, ang BL21 E. coli cell ay walang recA1 mutation, habang ang DH5 Alpha E. coli cell ay mayroong recA1 mutation.
Inililista ng sumusunod na infographic ang mga pagkakaiba sa pagitan ng BL21 at DH5 Alpha sa tabular form.
Buod – BL21 vs DH5 Alpha
Ang mga non-pathogenic na strain ng E. coli ay genetically na binuo ng mga siyentipiko para sa mga pag-aaral sa pagpapahayag ng laboratoryo at mga layunin ng pag-clone. Ang BL21 at DH5 Alpha ay dalawang genetically engineered na E. coli cells. Pangunahing ginagamit ang BL21 para sa mga pag-aaral ng pagpapahayag ng protina. Sa kabilang banda, ang DH5 Alpha ay pangunahing ginagamit para sa mga layunin ng pagbabagong-anyo ng plasmid. Kaya, ito ang buod ng pagkakaiba sa pagitan ng BL21 at DH5 Alpha.
