Mahalagang Pagkakaiba – Protein A kumpara sa Protein G
Ang purification ng IgG antibodies, ang kanilang mga subclass at iba pang uri ng immunoglobulins (IgA, IgE, IgD at IgM) ay karaniwang ginagawa sa pamamagitan ng paggamit ng bacterial proteins na may mataas na affinity patungo sa Fc region ng mga antibodies na ito. Ang Protein A at Protein G ay mga bacterial recombinant na protina na lubos na inirerekomenda para sa layunin ng paglilinis ng mga immunoglobulin ng tao at iba pang mga hayop. At gayundin ang protina A, protina G, protina A/G at protina L ay mga katutubong microbial recombinant na protina na may mga partikular na binding site para sa rehiyon ng Fc ng mammalian IgG antibodies. Maliban diyan, ang mga microbial protein na ito ay maaari ding gamitin upang linisin ang iba pang mga uri ng immunoglobulin tulad ng IgA, IgE, IgD, at IgM sa mga mammal at iba pang mga hayop tulad ng kuneho, daga, tupa, baka atbp. Ang Protein A ay nagbubuklod sa mga antibodies ng tao maliban sa IgG antibody. Ngunit mahina itong nagbubuklod sa IgG ng tao3 subclass at hindi ito nagbubuklod sa human antibody IgD. Ang Protein G ay nagbubuklod sa lahat ng mga subtype ng IgG antibodies ng tao at ito ay mas maraming nalalaman kapag nagbubuklod sa IgG antibodies ng iba pang mga species. Gayunpaman, ang protina G ay hindi nagbubuklod sa iba pang mga uri ng mga antibodies ng tao maliban sa IgG. Ang protina G ay may mas mataas na kaugnayan sa IgG kaysa sa protina A. Ito ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng protina A at protina G.
Ano ang Protein A?
Ang Protein A ay tinukoy bilang isang surface protein na nasa laki na 42 kDa. Ang protina A ay orihinal na matatagpuan sa cell wall ng Staphylococcus aureus. Ito ay naka-encode ng "spa" gene. Ang Protein A ay kinokontrol ng DNA topology, cellular osmolarity, at isang two-component system. Ang microbial recombinant na protina na ito ay lubos na kasangkot sa mga biochemical na reaksyon, dahil sa kakayahan nitong magbigkis sa ilang uri ng antibodies tulad ng IgG, IgA, IgE, at IgM. Kaya, ang microbial protein na ito ay ginagamit upang linisin ang mga uri ng antibody ng tao. Nagkakaroon ito ng limang homologous na "Ig" binding domain na nakatiklop sa tatlong-helix na bundle. Ang bawat domain ay may kakayahang mag-binding sa mga immunoglobulin na protina mula sa maraming mammalian species, lalo na sa mga IgG antibodies. Ang Protein A ay partikular na nagbubuklod sa mabigat na kadena ng rehiyon ng Fc ng karamihan sa mga immunoglobulin.
Tungkol sa mga protina ng pamilya ng VH3 ng tao, ang Protein A ay nagbubuklod sa rehiyon ng Fab. Ang recombinant protein A ay mas malawak sa kakayahang magbigkis sa iba pang mga antibodies ng tao (IgA, IgE, IgM) maliban sa IgG antibody. Ngunit mahina ito sa IgG ng tao3 subclass at hindi ito nagbubuklod sa IgD human antibody. Ang Protein A ay may kakayahang mag-binding sa IgG antibodies ng iba pang mga species tulad ng kabayo, kuneho, daga, aso, unggoy, baka atbp.
Figure 01: Protein A
Protein A ay gumaganap ng isang mahalagang papel sa Staphylococcus aureus pathogenesis. Pinapadali ng protina na ito ang pagbubuklod ng bakterya sa ibabaw na pinahiran ng kadahilanan ng Von-Willebrand ng tao. Kaya, pinapataas nito ang kahusayan sa impeksyon sa bacterial. Pinipigilan din ng Protein A ang human humoral mediated immunity. Ang microbial recombinant protein na ito ay ginawa sa pamamagitan ng industriyal na proseso ng fermentation.
Ano ang Protein G?
Ang Protein G ay tinukoy bilang immunoglobulin binding protein na partikular na ipinahayag ng group C at D streptococcal bacteria. Ito ay may mataas na kaugnayan sa mga rehiyon ng Fc at Fab ng mga antibodies. Ang Protein G ay may humigit-kumulang 65kDa molecular size.
Ang Protein G ay isang surface protein. Dahil sa pagkakaugnay nito sa mga immunoglobulin, ginagamit ito para sa paglilinis ng antibody. Ang Protein G ay nagbubuklod sa lahat ng mga subtype ng IgG antibodies ng tao at ito ay mas maraming nalalaman kapag nagbubuklod din sa mga IgG antibodies ng iba pang mga species. Ngunit hindi ito nagbubuklod sa iba pang mga uri ng antibody ng tao (IgA, IgE, IgM, IgD). Ang pagtitiklop ng mga domain ng protina G – B1 sa isa't isa ay nagreresulta ng globular na protina.
Ano ang Pagkakatulad sa pagitan ng Protein A at Protein G?
- Parehong mga microbial protein.
- Parehong mga recombinant na protina.
- Ang parehong mga protina ay may mataas na kaugnayan sa human IgG antibody at mga subclass nito.
- Parehong ginagamit para sa paglilinis ng mga immunoglobulin.
- Ang parehong mga protina ay maaaring magbigkis sa rehiyon ng Fc ng mga immunoglobulin.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng Protein A at Protein G?
Protein A vs Protein G |
|
| Ang Protein A ay tinukoy bilang isang 42 kDa size surface protein na orihinal na matatagpuan sa cell wall ng Staphylococcus aureus. | Ang Protein G ay tinukoy bilang 65kDa size surface immunoglobulin binding protein na partikular na ipinahayag ng group C at D streptococcal bacteria. |
| Pagpapahayag ng Uri ng Bakterya | |
| Protein A ay ipinahayag ng Staphylococcus aureus | Ang protina G ay ipinahayag ng pangkat C at D streptococcal bacteria. |
| Laki ng Molekular | |
| Ang Protein A ay may sukat na 42kDa. | Ang Protein G ay may humigit-kumulang 65kDa na laki (G148 protein G-65kDa at C40 protein G- 58kDa). |
| Nagbubuklod sa Human Serum Albumin | |
| Ang Protein A ay hindi nagbubuklod sa serum albumin. | May mga binding site ang Protein G para sa serum albumin. |
| Purification of Human IgG3 Subclass | |
| Protein A ay hindi maaaring gamitin para sa purification ng human IgG3 subclass dahil hindi ito nagbubuklod sa human IgG3 subclass immunoglobulin. | Protein G ay maaaring gamitin para sa purification ng human IgG3 subclass dahil ito ay nagbubuklod sa human IgG3 subclass immunoglobulin. |
| Purification of Other Human Antibodies (IgA, IgE at IgM) | |
| Ang Protein A ay may mas mataas na kakayahang magbigkis sa iba pang mga antibodies ng tao maliban sa IgG antibody. Kaya, maaari itong magamit upang linisin ang iba pang mga antibodies ng tao tulad ng; IgA, IgE at IgM. | Ang Protein G ay nagbubuklod sa lahat ng mga subtype ng human IgG antibodies. Ngunit ang protina G ay hindi nagbubuklod sa iba pang mga antibodies ng tao tulad ng; IgA, IgE at IgM. Kaya, hindi ito magagamit upang linisin ang iba pang mga antibodies ng tao tulad ng; IgA, IgE at IgM |
Buod – Protein A vs Protein G
Ang microbial recombinant protein A, protein G, protein A/G at protein L ay mga native bacterial protein na may mga partikular na binding site para sa Fc region ng mammalian IgG antibodies. Ang protina A at protina G ay mayroon ding mga binding site para sa iba pang IgG antibodies ng iba pang mga species. Ang protina A at protina G ay mga bacterial recombinant na protina na lubos na inirerekomenda para sa layunin ng paglilinis ng mga immunoglobulin ng IgG ng tao at iba pang mga hayop. Ang Protein L ay may mataas na kaugnayan sa mga kappa light chain ng immunoglobulin classes na IgG, IgA, at IgM. Kaya, ang protina L ay maaaring isama upang linisin ang mga uri ng immunoglobulin na ito sa mga tao at iba pang mga species. Sa industriya lahat ng mga bacterial protein na ito ay kasalukuyang ginagamit upang linisin ang mga immunoglobulin tulad ng; IgG, IgA, IgD, IgE, at IgM. Maaari itong ilarawan bilang pagkakaiba sa pagitan ng Protein A at Protein G.
I-download ang PDF Version ng Protein A vs Protein G
Maaari mong i-download ang PDF na bersyon ng artikulong ito at gamitin ito para sa mga offline na layunin ayon sa tala ng pagsipi. Paki-download ang bersyon ng PDF dito Pagkakaiba sa pagitan ng Protein A at Protein G
