Mahalagang Pagkakaiba – Immunocytochemistry vs Immunohistochemistry
Ang Immunocytochemistry (ICC) at Immunohistochemistry (IHC) ay dalawang malawakang ginagamit na diskarte sa molecular diagnostics, na tumutukoy at nagkukumpirma sa paglitaw ng parehong hindi nakakahawang sakit at nakakahawang sakit batay sa mga molecular marker na nasa mga cell. Ang pangunahing pagkakaiba ng immunocytochemistry at immunohistochemistry ay ang molekula na ginagamit bilang pamamaraan ng pagsusuri sa mga diskarteng ito. Sa ICC, ang pangunahin at pangalawang antibodies na pinagsama sa mga marker tulad ng fluorescence ay ginagamit samantalang ang IHC, monoclonal at polyclonal antibodies ay ginagamit para sa diagnostic determinations.
Ano ang Immunocytochemistry (ICC)?
Ang ICC ay gumagamit ng pangunahin at pangalawang antibodies na nakagapos sa mga marker gaya ng mga fluorescent marker o enzymes at ito ay isang mahusay na paraan ng pag-detect upang matukoy ang mga antigen na naroroon sa mga target na cell na maaaring mga nakakahawang cellular particle o cancerous na tumor cells. Tatlong uri ng mga kontrol ang kailangan para sa immunocytochemistry.
- Primary Antibody – kontrol na nagpapakita ng pagtitiyak ng pangunahing antibody na nagbubuklod sa antigen
- Secondary Antibody – kontrol na nagpapakita na ang label ay partikular sa pangunahing antibody
- Mga Kontrol ng Label – ipakita na ang pag-label ay ang resulta ng label na idinagdag at hindi ang resulta ng endogenous na pag-label.
Figure 01: Ang immunocytochemistry ay may label na mga indibidwal na protina sa loob ng mga cell (dito, ang Tyrosine hydroxylase sa mga axon ng sympathetic autonomic neuron ay ipinapakita sa berde).
Ang pangunahing kontrol ng antibody ay partikular para sa bawat bagong antibody at hindi maaaring ulitin para sa bawat eksperimento. Ang pangalawang kontrol ng antibody ay idinisenyo batay sa pangunahing antibody na ginamit sa eksperimento at kasama sa bawat eksperimento. Kasama ang kontrol sa pag-label kung binago ang isang kundisyon ng pamamaraan, binago ang sample, o kapag may nakitang hindi inaasahang pag-label.
Ang dalawang pangunahing aplikasyon ng ICC ay Radio Immuno – Assay (RIA) at Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Ang pinakakaraniwang antibody na ginagamit ay ang immunoglobulin G.
Ano ang Immunohistochemistry (IHC)?
Sa Immunohistochemistry, ang pinagmulang sample ay naglalaman ng mga monoclonal at polyclonal antibodies upang matukoy ang pagkakaroon ng mga antigen sa mga dayuhang selula. Ang pamamaraan na ito ay batay sa tiyak na reaksyon ng antigen-antibody binding. Ang mga antibodies na ginamit sa pagtuklas ay maaaring ma-tag ng iba't ibang mga marker; maaari silang mga fluorescence marker, radiolabeled marker o chemical marker. Sa pamamagitan ng pagpapadali ng in vitro binding sa pagitan ng antigen at ng target na antibody, matutukoy ang presensya o kawalan ng isang partikular na protina ng isang cell.
Figure 02: Immunohistochemical staining ng normal na kidney na may CD10
Sa kasalukuyan, ang mga siyentipiko ay kasangkot sa pagbuo ng mga target na antibodies para sa mga partikular na antigen na nasa mga cell na maaaring bumuo bilang mga malignant na tumor cells o antigens na nasa mga nakakahawang ahente gaya ng HIV.
Ano ang Mga Pagkakatulad sa Pagitan ng Immunocytochemistry at Immunohistochemistry?
- Ang mga reaksyon ay lubos na partikular at tumpak sa ICC at IHC.
- Ang mga aplikasyon ng ICC at IHC ay kinabibilangan ng mga diagnostic ng cancer at mga nakakahawang sakit.
- Dapat na panatilihin ang mga sterile na kondisyon sa parehong mga kondisyon, at dapat itong gawin sa in vitro
- Ang parehong mga diskarte ay nagbibigay ng mga reproducible na resulta.
- Parehong mabilis.
- Ang radio labeling, fluorescence technique ay ginagamit bilang mga paraan ng pagtuklas sa parehong ICC at IHC.
- Parehong nakabatay sa pagpapares ng antigen-antibody.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng Immunocytochemistry at Immunohistochemistry?
Immunocytochemistry (ICC) vs Immunohistochemistry (IHC) |
|
Gumagamit ang ICC ng pangunahin at pangalawang antibodies na nakatali na mga marker gaya ng mga fluorescent marker o enzymes at ito ay isang mahusay na paraan ng pagtuklas upang makita ang mga antigen na naroroon sa mga target na cell. | Ang IHC ay isang paraan na gumagamit ng monoclonal at polyclonal antibodies upang matukoy ang pagkakaroon ng mga antigen na mga espesyal na marker ng protina na inilagay sa ibabaw ng cell. |
Sample Source | |
Ang mga sample na nagmula sa mga tissue na naproseso ayon sa histologically sa manipis na mga seksyon ay ginagamit sa ICC. | IHC ay gumagamit ng mga sample na binubuo ng mga cell na lumaki sa isang monolayer o mga cell na nakasuspinde na nakadeposito sa isang slide. |
Sample Processing | |
Sa ICC, ang mga cell ay dapat na permeable upang mapadali ang pagtagos ng antibody sa mga intracellular na target. | Sa IHC, ang mga cell ay formalin-fixed, paraffin-embeded bago mantsa. |
Buod – Immunocytochemistry vs Immunohistochemistry
Molecular diagnostics ay ginagamit upang matukoy at kumpirmahin ang paglitaw ng parehong hindi nakakahawang sakit at nakakahawang sakit batay sa mga molecular marker na nasa mga cell. Ang mga molecular marker ay maaaring mga protina o sequence ng DNA o RNA; Ang pagbuo ng mga teknolohiya tulad ng ICC at IHC ay nagbigay daan para sa mga siyentipiko na matukoy ang sakit at ang sanhi nito sa maagang yugto. Ang parehong ICC at IHC ay nakasalalay sa mga tiyak na reaksyon sa pagitan ng antibody at antigen kahit na ang sample na pinagmulan. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng immunocytochemistry at immunohistochemistry ay ang sample processing ng dalawang procedure.
I-download ang Bersyon ng PDF ng Immunocytochemistry vs Immunohistochemistry
Maaari mong i-download ang PDF na bersyon ng artikulong ito at gamitin ito para sa mga offline na layunin ayon sa tala ng pagsipi. Paki-download ang bersyon ng PDF dito Pagkakaiba sa pagitan ng Immunocytochemistry at Immunohistochemistry.