Mahalagang Pagkakaiba – In Situ Hybridization vs Immunohistochemistry
Ang mga diagnostic ng kanser at nakakahawang sakit ay isang sikat na trend kung saan ginagamit ang mga nobelang proteomic at genomics based techniques para sa layunin ng pagtukoy ng mga tumor o infectious na mga cell, paglaganap nito at ang mga site ng pag-unlad ng cell at pagsusuri sa genetic na batayan ng pinaka nakakahawa at mga sakit na hindi nakakahawa. Magreresulta ito sa tumpak na pagpoproseso at pagdidisenyo ng gamot at sa pagbuo ng mga customized na therapy para sa mga sakit. Ang in situ hybridization (ISH) at Immunohistochemistry (IHC) ay dalawang malawak na ginagamit na mga diskarte sa biology ng cancer at ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng in situ hybridization at immunochemistry ay nasa mga molekula na ginagamit sa pamamaraan ng pagsusuri. Sa ISH, ang mga nucleic acid probe ay ginagamit sa pagsusuri samantalang, sa IHC, monoclonal at polyclonal antibodies ay ginagamit para sa diagnostic determinations.
Ano ang In Situ Hybridization (ISH)?
In situ hybridization ay isang nucleic acid hybridization technique na direktang ginagawa sa isang bahagi o seksyon ng tissue, sa buong tissue o sa mga cell. Ang pamamaraan ay nakasalalay sa teorya ng Watson Crick na komplementaryong base pairing, na nagreresulta sa alinman sa DNA-DNA hybrids o DNA-RNA hybrids na maaaring makakita ng mutated genes o makilala ang kinakailangang gene ng interes. Ang mga single stranded DNA sequence, double stranded DNA sequence, single stranded RNA sequence o synthetic oligonucleotide sequence ay ginagamit bilang probes sa panahon ng hybridization technique, at ang mga probe na ito ay may label na radioactive phosphorus sa dulo nito na 5' para sa mga pamamaraan ng pagkilala sa autoradiography o may label gamit ang fluorescent dyes. Mayroong iba't ibang uri ng mga diskarte sa ISH na magagamit batay sa uri ng probe na ginamit at ang uri ng visualization technique na sinusunod.
Figure 01: Fluorescent In Situ Hybridization
Maraming aplikasyon ng ISH, pangunahin sa mga molecular diagnostics ng mga nakakahawang sakit upang matukoy ang pagkakaroon ng mga pathogen at upang kumpirmahin ang pathogen sa pamamagitan ng molecular diagnostics. Ginagamit din ito sa mga larangan ng developmental biology, karyotyping at phylogenetic analysis at pisikal na pagmamapa ng mga chromosome.
Ano ang Immunohistochemistry (IHC)?
Sa pamamaraan ng IHC, ang pangunahing molekula na nasuri ay ang antigen. Sa panahon ng IHC, ang mga monoclonal at polyclonal antibodies ay ginagamit upang matukoy ang pagkakaroon ng mga antigen sa panahon ng impeksyon o katayuan ng paglaganap ng malignant na cell. Ang pamamaraan ay batay sa antigen-antibody binding, at ang mga label ng enzyme ay ginagamit para sa pamamaraang ito; ang isang naturang aplikasyon ay ang ELISA (Enzyme linked immunosorbent assay). Ang mga marker ay maaari ding fluorescent tagged antibodies o radio labeled antibodies.
Figure 02: Immunohistochemistry
Ang IHC ay malawakang ginagamit para sa pagtuklas ng selula ng kanser. Ang mga diagnostic procedure ay nagta-target sa mga antigen na naroroon sa mga selula ng tumor upang makilala at makilala ang tumor. Ang parehong pamamaraan ay isinama upang masuri ang mga nakakahawang ahente. Ginagamit din ang mga monoclonal at Polyclonal antibodies para pag-aralan ang iba't ibang gene products sa pamamagitan ng pagpapagana ng antibody-antigen binding reaction sa pagitan ng gustong protina at ng synthetic na antibody na ibinibigay.
Ano ang Mga Pagkakatulad sa pagitan ng In Situ Hybridization at Immunohistochemistry?
- Ang ISH at IHC ay mga partikular na reaksyon.
- Ang parehong mga diskarte ay lubos na tumpak.
- Maaaring gamitin ang parehong mga diskarte sa diagnostic para sa cancer at mga nakakahawang sakit.
- Ang mga diskarteng ito ay ginagawa sa mga sterile na in-vitro na kapaligiran.
- Parehong mga mabilis na pamamaraan na nagbibigay ng mga resultang maaaring kopyahin.
- ISH at IHC ay gumagamit ng mga paraan ng pagtuklas gaya ng radio labeling, at fluorescence techniques.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng In Situ Hybridization at Immunohistochemistry?
In Situ Hybridization vs Immunohistochemistry |
|
| Ang ISH ay isang nucleic acid hybridization technique na direktang ginagawa sa isang bahagi o seksyon ng tissue o sa buong tissue. | Ang IHC ay isang pamamaraan kung saan ginagamit ang mga monoclonal at polyclonal antibodies upang matukoy ang pagkakaroon ng mga antigen, na mga espesyal na marker ng protina na inilalagay sa ibabaw ng cell. |
| Uri ng Bio Molecules na Nasuri | |
| Sinasuri ng ISH ang mga nucleic acid. | Sinasuri ng IHC ang mga protina-antigens. |
| Batayan ng Biochemical Reaction | |
| Ang komplementaryong pagpapares ng base sa pagitan ng DNA-DNA o DNA-RNA ay nangyayari sa diskarteng ito. | Ang mga pakikipag-ugnayan ng antigen-antibody ay kasangkot sa immunohistochemistry. |
| Mga Paraan ng Pagtukoy na Naka-link sa Enzyme | |
| Hindi magagamit ang mga paraan ng pagtuklas na naka-link sa enzyme sa ISH. | Ang mga paraan ng pagtuklas na naka-link ng enzyme ay maaaring gamitin sa IHC. |
Buod – In Situ Hybridization vs Immunohistochemistry
Molecular diagnostics ay mabilis at nagpapatunay na mga pamamaraan na maaaring magamit upang matukoy ang isang hindi nakakahawang sakit tulad ng cancer o nakakahawang sakit tulad ng HIV o Tuberculosis batay sa mga molekular na marker na nasa mga selula na humahantong sa pagpapakita ng sakit. Ang mga molekular na marker ay maaaring naroroon sa anyo ng mga ipinahayag na protina o sa antas ng genetic batay sa kung saan ang iba't ibang mga diskarte sa nobela ay ipinakilala upang madagdagan ang kahusayan at hindi gaanong matrabaho, bagaman mayroong isang mataas na gastos na kasangkot sa mga pamamaraan na ito. Kaya ang ISH ay nakasalalay sa DNA-DNA o DNA-RNA hybrid formation, at ang IHC ay nakasalalay sa mga tiyak na reaksyon sa pagitan ng antibody at antigen. Ito ang pagkakaiba sa pagitan ng in situ hybridization.
I-download ang PDF Version ng In Situ Hybridization vs Immunohistochemistry
Maaari mong i-download ang PDF na bersyon ng artikulong ito at gamitin ito para sa mga offline na layunin ayon sa tala ng pagsipi. Paki-download ang bersyon ng PDF dito Pagkakaiba sa pagitan ng In Situ Hybridization at Immunohistochemistry.
