Mahalagang Pagkakaiba – Pagkuha ng DNA kumpara sa RNA
Ang pag-aaral ng DNA at RNA ay mahahalagang aspeto upang maunawaan ang mga pangunahing konsepto ng molecular biology, biotechnology, at genetics. Ang pagkuha ng purong DNA at RNA sample ay kinakailangan upang maisagawa ang mga eksperimentong pamamaraan sa panahon ng mga pag-aaral na ito. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng pagkuha ng DNA at RNA ay ang proseso ng pagkuha ng DNA ay nagpapadalisay sa DNA habang ang pagkuha ng RNA ay naglilinis ng RNA. Ang proseso ng pagkuha ng DNA ay may tatlong magkakaibang hakbang: cell lysis at catabolism ng lamad lipids at protina, clumping ng catabolites sa pamamagitan ng puro asin solusyon at ang precipitation ng DNA na may ethanol. Ang tatlong hakbang na pamamaraan ay maaaring binubuo ng dalawang opsyonal na hakbang. Ang proseso ng paglilinis ng RNA ay binubuo ng apat na magkakaibang hakbang: pagdaragdag ng guanidium thiocyanate para sa cell lysis, denaturation ng protina kabilang ang ribonucleases, paghihiwalay ng RNA sa pamamagitan ng pagdaragdag ng chloroform at phenol at ang paghuhugas ng precipitate gamit ang ethanol.
Ano ang DNA Extraction?
Ang DNA extraction ay isang pisikal at kemikal na proseso na ginagamit upang linisin ang DNA mula sa isang sample. Ang pagkuha ng DNA ay isang mahalagang aspeto sa konteksto ng molecular biology at forensic sciences. Ang proseso ay may tatlong pangunahing hakbang. Sa una, ang mga cell ng interes ay dapat makuha. Susunod, ang cell lysis ay pinadali upang masira ang lamad ng cell, na nagbubukas ng cell at inilalantad ang cytoplasm kasama ng DNA. Ang mga surfactant o iba pang mga detergent ay maaaring gamitin upang i-lyse ang mga lipid mula sa cell membrane habang ang mga protina na naroroon ay na-catabolize ng mga protease. Isa itong opsyonal na hakbang. Kapag ang cell ay lysed, ang pagkumpol ng mga catabolized molecule ay pinadali ng puro asin solusyon. Sinusundan ito ng centrifugation ng solusyon na naghihiwalay sa mga debris clumps mula sa DNA. Sa yugtong ito, ang pagkakaiba-iba ng DNA ay nahahalo sa mga reagents at s alt na ginamit sa panahon ng cell cycle.
Figure 01: Pagkuha ng DNA
Upang mapadalisay pa ito, maaaring gamitin ang mga sumusunod na hakbang. Ang isang paraan ay ang pag-ulan ng ethanol, na kinabibilangan ng paghahalo ng malamig na ethanol sa hiwalay na sample ng DNA. Ang DNA ay hindi matutunaw sa alkohol at sa gayon ay gumagawa ng isang pellet dahil sa pagsasama-sama ng mga molekula ng DNA. Ang sodium acetate ay idinagdag sa prosesong ito upang mapahusay ang antas ng pag-ulan sa pamamagitan ng pagtaas ng lakas ng ionic. Bilang karagdagan sa proseso ng pag-ulan ng ethanol, ang proseso ng pagkuha ng phenol-chloroform ay maaari ding ma-induce para dito. Sa pamamaraang ito, ang phenol ay nagdenature ng mga protina na naroroon sa sample. Kapag na-centrifuged, ang mga na-denatured na protina ay mananatili sa organic na bahagi habang ang mga molekula ng DNA na may halong chloroform ay mananatili sa aqueous phase. Tatanggalin ng chloroform ang mga residue ng phenol. Kapag nakumpleto na ang pagkuha, ang DNA ay pinananatiling natutunaw sa TE buffer o ultra purong tubig.
Ano ang RNA Extraction?
Ang RNA purification ay isang proseso kung saan nililinis ang RNA mula sa isang biological sample. Dahil sa pagkakaroon ng ribonuclease sa mga selula at tisyu, ang prosesong ito ay kumplikado. Ang Ribonuclease enzyme ay may kakayahang mabilis na mapababa ang RNA. Ang kemikal na katangian ng ribonucleases ay lubhang matatag, at mahirap i-inactivate ang mga ito. Ang pag-neutralize sa mga ribonucleases ay isang opsyon. Dahil ang enzyme na ito ay nasa lahat ng dako sa mga selula at tisyu, ang mga espesyal na pamamaraan ay binuo para sa pagkuha ng RNA. Sa maraming paraan, ang karaniwang paraan ay Guanidinium thiocynate-phenol-chloroform extraction.
Figure 02: RNA Extraction
Ang paraan ng pagkuha ng Guanidinium thiocynate-phenol-chloroform ay depende sa centrifugation at phase separation. Ang halo na ise-centrifuge ay binubuo ng may tubig na sample at isang water saturated solution na binubuo ng phenol at chloroform. Kapag na-centrifuged, ang solusyon ay binubuo ng isang upper aqueous phase at isang lower organic phase sa ilalim ng neutral na pH na mga kondisyon (pH 7-8). Ang RNA ay naroroon sa aqueous phase. Ang organic phase ay karaniwang binubuo ng mga protina na natunaw sa phenol at mga lipid na natunaw sa chloroform. Ang isang chaotropic agent (isang molekula na may kakayahang sirain ang mga bono ng hydrogen sa pagitan ng mga molekula ng tubig) ay idinagdag; ito ay kilala bilang, guanidinium thiocyanate. Ang ahente na ito ay may kakayahang mag-denature ng mga protina na kinabibilangan ng mga ribonucleases na maaaring magpababa ng RNA at kasangkot sa cell lysis. Ito rin ay naghihiwalay ng rRNA mula sa mga ribosomal na protina. Ang huling hakbang ng RNA purification ay ang paghuhugas ng precipitation ng aqueous phase na may ethanol. Maaari ding linisin ang RNA gamit ang liquid nitrogen.
Ano ang Pagkakatulad sa Pagitan ng DNA at RNA Extraction?
- Ang parehong proseso ng pagkuha ay gumagamit ng mga mapaminsalang kemikal gaya ng phenol at chloroform.
- Ang centrifugation ay isang mahalagang pamamaraan para sa parehong proseso.
- Ginagamit ang ethanol para hugasan ang precipitate at para makakuha ng purified DNA o RNA.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng DNA at RNA Extraction?
DNA vs RNA Extraction |
|
| Ang DNA extraction ay isang proseso na kumukuha ng DNA mula sa isang organismo o sample. | Ang RNA extraction ay isang proseso na kumukuha ng RNA mula sa isang sample. |
| Mga Hakbang | |
| Ang proseso ng pagkuha ng DNA ay binubuo ng tatlong magkakaibang hakbang na may dalawang opsyonal na hakbang. | Ang proseso ng pagkuha ng RNA ay binubuo ng apat na magkakaibang hakbang. |
| Reagents | |
| Ang mga surfactant, protease (opsyonal), alcohol, chloroform, phenol, sodium acetate ay ginagamit para sa pagkuha ng DNA. | Guanidium thiocyanate, chloroform, phenol, ethanol ay ginagamit para sa RNA extraction. |
Buod – DNA vs RNA Extraction
Ang DNA at RNA extraction ay mahahalagang aspeto ng mga eksperimentong pamamaraan para sa pag-aaral ng molecular biology, genetics, at biotechnology. Ang parehong mga proseso ay nagsasangkot ng magkatulad na mga reagents, ngunit ang RNA extraction ay gumagamit ng isang espesyal na reagent na kilala bilang Guanidium thiocyanate na nagpapaliit sa aktibidad ng ribonucleases. Ito ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng DNA at RNA extraction.
I-download ang PDF Version ng DNA vs RNA Extraction
Maaari mong i-download ang PDF na bersyon ng artikulong ito at gamitin ito para sa mga offline na layunin ayon sa tala ng pagsipi. Paki-download ang bersyon ng PDF dito Pagkakaiba sa Pagitan ng DNA at RNA Extraction
