Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng isocratic at gradient elution ay ang isocratic elution ay tumutukoy sa pagpapanatili ng pare-parehong konsentrasyon sa mobile phase, samantalang ang gradient elution ay tumutukoy sa pagpapanatili ng iba't ibang konsentrasyon sa mobile phase.
Ang mga terminong isocratic at gradient elution ay ginagamit sa chromatography. Sa panahon ng isang chromatographic run, gumagamit kami ng isang nakatigil na yugto, na isang hindi gumagalaw na substansiya, kasama ng isang mobile phase, ang gumagalaw na sangkap. Inilalarawan ng isocratic at gradient elution ang mga katangian ng mobile phase.
Ano ang Isocratic Elution?
Ang Isocratic elution ay isang terminong ginagamit sa chromatography kapag ang mobile phase ay may pare-parehong konsentrasyon. Dito, ang konsentrasyon ng mobile phase ay pare-pareho sa buong proseso ng chromatographic. Sa prosesong ito, mapapansin natin ang pagtaas ng peak width na may linear na retention time sa chromatogram. Gayunpaman, humahantong ito sa isang kawalan - ang late-eluting peak para sa late elution ay nagiging napaka-flat at malawak. Samakatuwid, ang malalawak na mga taluktok na ito ay nagiging mahirap na kilalanin bilang mga taluktok.
Bukod dito, sa isocratic elution, hindi nagbabago ang selectivity ayon sa mga dimensyon ng column. Nangangahulugan ito na ang pagpili ay hindi nakasalalay sa mga pagbabago sa mga sukat ng column. Dito, ang haba at diameter ay itinuturing bilang mga sukat ng haligi. Samakatuwid, ang mga taluktok ay lumalabas sa parehong pagkakasunud-sunod.
Ano ang Gradient Elution?
Ang Gradient elution ay isang terminong ginagamit sa chromatography kapag dito ang mobile phase ay may iba't ibang konsentrasyon. Sa madaling salita, ang konsentrasyon ng mobile phase ay hindi kailangang manatiling pare-pareho. Halimbawa, sa HPLC, ang karaniwang paraan ng paghihiwalay ay gumagamit ng methanol na 10% sa simula at nagtatapos sa 90%, sa pamamagitan ng unti-unting pagtaas ng konsentrasyon. Ang mobile phase ay may dalawang bahagi: isang mahinang solvent at isang malakas na solvent. Ang mahinang solvent ay nagpapahintulot sa solute na mabagal na mag-elute habang ang malakas na solvent ay nagiging sanhi ng mabilis na elution ng solute. Sa reverse phase chromatography, ginagamit namin ang tubig bilang mahinang solvent at organic solvent bilang malakas na solvent.
Figure 01: HPLC
Bukod dito, binabawasan ng paraan ng gradient elution ang mga susunod na bahagi ng eluting upang gawing mas mabilis ang elute ng mga ito, na nagbibigay ng makitid na peak sa chromatogram. Ang pamamaraang ito ay nagpapabuti sa tuktok na hugis at sa tuktok na taas din. Higit pa rito, sa gradient elution technique, nagbabago ang elution order sa mga pagbabago sa mga dimensyon ng column.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng Isocratic at Gradient Elution?
Ang mga terminong isocratic at gradient elution ay ginagamit sa chromatography. Inilalarawan ng Isocratic at gradient elution ang mga katangian ng mobile phase. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng isocratic at gradient elution ay ang isocratic elution ay tumutukoy sa pagpapanatili ng pare-parehong konsentrasyon sa mobile phase samantalang ang gradient elution ay tumutukoy sa pagpapanatili ng iba't ibang konsentrasyon sa mobile phase.
Sa isocratic elution technique, tumataas ang peak width habang linear ang retention time. Gayunpaman, sa gradient elution technique, ang retention ng mga later-eluting na bahagi ay nababawasan, upang ang elution ay maging mas mabilis at nagbibigay ng makitid na mga taluktok. Bukod pa riyan, sa isocratic elution, ang selectivity ay hindi nakadepende sa mga dimensyon ng column, ngunit sa gradient elution, nagbabago ang selectivity sa pagbabago ng mga dimensyon ng column.
Ang sumusunod na talahanayan ay nagbubuod sa pagkakaiba sa pagitan ng isocratic at gradient elution.
Buod – Isocratic vs Gradient Elution
Inilalarawan ng Isocratic elution at gradient elution ang mga katangian ng mobile phase. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng isocratic at gradient elution ay ang isocratic elution ay tumutukoy sa pagpapanatili ng pare-parehong konsentrasyon sa mobile phase samantalang ang gradient elution ay tumutukoy sa pagpapanatili ng iba't ibang konsentrasyon sa mobile phase.
