Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng absorbance at fluorescence ay maaari tayong gumamit ng absorbance analysis technique upang direktang sukatin ang dami ng isang partikular na wavelength na na-absorb ng sample nang walang dilution o assay preparation, samantalang ang fluorescence analysis ay nangangailangan ng sample na paghahanda kung saan sample ng interes ay dapat na nakatali sa fluorescent reagents sa isang assay kit.
Ang pagsipsip at fluorescence ay mahalagang analytical technique na magagamit namin para makita ang iba't ibang katangian sa isang sample.
Ano ang Absorbance?
Ang Absorbance ay isang sukatan ng kapasidad ng isang substance na sumipsip ng liwanag ng isang tinukoy na wavelength. Sa partikular, ito ay katumbas ng logarithm ng reciprocal ng transmittance. Hindi tulad ng optical density, sinusukat ng absorbance ang dami ng liwanag na na-absorb ng isang substance.
Higit pa rito, sinusukat ng spectroscopy ang absorbance (gamit ang colorimeter o spectrophotometer). Ang pagsipsip ay isang walang sukat na pag-aari, hindi katulad ng karamihan sa iba pang mga pisikal na katangian. Mayroong dalawang mga paraan upang ipaliwanag ang pagsipsip: bilang ang ilaw na hinihigop ng isang sample o bilang ang liwanag na ipinadala sa pamamagitan ng isang sample. Ang equation para sa pagkalkula ng absorbance ay ang mga sumusunod:
A=log10(I0/I)
Kung saan ang A ay absorbance, ang I0 ay ang radiation na ipinadala mula sa sample, at ang I ay ang incident radiation. Ang sumusunod na equation ay katulad din ng equation sa itaas sa mga tuntunin ng transmittance (T).
A=-log10T
Ano ang Fluorescence?
Ang Fluorescence ay ang paglabas ng liwanag mula sa isang substance na sumipsip ng enerhiya dati. Ang mga naturang sangkap ay kailangang sumipsip ng liwanag o anumang iba pang electromagnetic radiation upang maglabas ng liwanag bilang fluorescence. Higit pa rito, ang naglalabas na liwanag na ito ay isang uri ng luminescence, ibig sabihin ay kusang naglalabas ito. Ang inilalabas na liwanag ay kadalasang may mas mahabang wavelength kaysa sa hinihigop na liwanag. Ibig sabihin, mas mababa ang ibinubuga na light energy kaysa sa absorbed energy.
Sa panahon ng proseso ng fluorescence, ang liwanag ay ibinubuga bilang resulta ng paggulo ng mga atomo sa substance. Ang hinihigop na enerhiya ay kadalasang inilalabas bilang luminescence sa napakaikling panahon, mga 10-8 segundo. Ibig sabihin, mapapansin natin ang fluorescence sa sandaling alisin natin ang pinagmulan ng radiation na nagdudulot ng paggulo.
Maraming aplikasyon ng fluorescence sa iba't ibang larangan, gaya ng mineralogy, gemology, gamot, chemical sensor, biochemical research, dyes, biological detector, fluorescent lamp production, atbp. Bukod dito, makikita natin ang prosesong ito bilang natural na proseso rin; halimbawa, sa ilang mineral.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng Absorbance at Fluorescence?
Ang absorbance at fluorescence ay mahalagang analytical technique na magagamit namin para makita ang iba't ibang katangian sa isang sample. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng absorbance at fluorescence ay maaari tayong gumamit ng absorbance analysis technique upang direktang sukatin ang dami ng isang partikular na wavelength na na-absorb ng isang sample nang walang dilution o assay preparation, samantalang ang fluorescence analysis ay nangangailangan ng sample na paghahanda kung saan ang sample ng interes ay dapat nakatali sa mga fluorescent reagents sa isang assay kit. Bukod dito, ang fluorescence technique ay mas epektibo kaysa sa absorbance dahil ang assay sa fluorescence ay lubos na partikular para sa target analyte.
Ang infographic sa ibaba ay nagpapakita ng mga pagkakaiba sa pagitan ng absorbance at fluorescence sa tabular form para sa magkatabi na paghahambing
Buod – Absorbance vs Fluorescence
Ang Absorbance ay isang sukatan ng kapasidad ng isang substance na sumipsip ng liwanag ng isang tinukoy na wavelength. Ang fluorescence ay ang paglabas ng liwanag mula sa isang substance na sumisipsip ng enerhiya dati. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng absorbance at fluorescence ay maaari tayong gumamit ng absorbance analysis technique upang direktang sukatin ang dami ng isang partikular na wavelength na na-absorb ng isang sample nang walang dilution o assay preparation, samantalang ang fluorescence analysis ay nangangailangan ng sample na paghahanda kung saan ang sample ng interes ay dapat nakatali sa mga fluorescent reagents sa isang assay kit.