Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng immunoprecipitation at coimmunoprecipitation ay ang immunoprecipitation ay isang technique na nagpapalabas ng protina mula sa solusyon gamit ang isang partikular na antibody, habang ang coimmunoprecipitation ay isang technique na nagpapalabas ng mga buo na protina complex mula sa solusyon gamit ang isang partikular na antibody.
Ang Antigen-antibody interaction ay isang partikular na kemikal na interaksyon sa pagitan ng mga antibodies na ginawa ng mga B cell at antigens (protina) sa panahon ng isang immune reaction. Karaniwan, ang mga natutunaw na antigen ay pinagsama sa mga natutunaw na antibodies sa pagkakaroon ng isang electrolyte sa natutunaw na temperatura at pH upang makagawa ng isang hindi matutunaw na nakikitang kumplikado. Ito ay tinatawag na precipitation reaction. Samakatuwid, ang immunoprecipitation at coimmunoprecipitation ay dalawang uri ng precipitation reactions na karaniwang ginagamit sa mga lab para matukoy ang mga protina gaya ng antigens.
Ano ang Immunoprecipitation?
Ang Immunoprecipitation ay isang pamamaraan ng pag-precipitate ng isang protina mula sa isang solusyon gamit ang isang partikular na antibody. Minsan, ang pamamaraan na ito ay kilala rin bilang indibidwal na immunoprecipitation ng protina. Gumagamit ang immunoprecipitation ng isang antibody upang ihiwalay ang isang napiling protina ng interes mula sa cell lysate. Nililinis ng antibody ang partikular na target na protina o antigen nito mula sa isang timpla. Ang antibody ay nagbubuklod sa protina, at ang antibody-antigen complex ay hinila palabas sa sample. Sa pang-eksperimentong setup, ang antigen-antibody complex ay hinuhugot gamit ang protina A/G na kaisa ng agarose o magnetic beads. Sa paglaon, ang mga butil ay hinugasan, at ang protina ng interes ay pinalabas. Ang purified protein o antigen na nakuha ng immunoprecipitation ay na-verify sa pamamagitan ng iba't ibang mga diskarte tulad ng enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) at western blot (WB).
Figure 01: Immunoprecipitation
Higit pa rito, ang mga nakahiwalay na protina o antigen ay maaaring ma-quantify at matukoy sa pamamagitan ng mass spectrometry sa pamamagitan ng paggamit ng mga enzymatic digestion pattern batay sa pangunahing sequence. Mayroong ilang mga pagsasaalang-alang bago magsimula ng isang eksperimento sa immunoprecipitation: pagpili ng format ng paraan, mga binding protein at beads, pagpili ng tamang pangunahing antibody at isotype, at negatibong kontrol.
Ano ang Coimmunoprecipitation?
Ang Coimmunoprecipitation ay isang pamamaraan ng pagpapalabas ng mga buo na protina complex sa solusyon gamit ang isang partikular na antibody. Ang coimmunoprecipitation ay karaniwang gumagana sa pamamagitan ng pagpili ng isang partikular na antibody na nagta-target ng isang kilalang protina (antigen) na pinaniniwalaang miyembro ng mas malaking complex ng mga protina. Sa pamamagitan ng pag-target sa kilalang miyembro na may isang partikular na antibody, posibleng makuha ang buong complex ng protina mula sa solusyon. Nagbibigay-daan ito sa pagkakakilanlan ng mga hindi kilalang miyembro ng complex. Ang konsepto ng pag-alis ng mga complex ng protina mula sa solusyon ay minsang tinutukoy bilang mekanismong "pull-down."
Figure 02: B Coimmunoprecipitation
Ang Coimmunoprecipitation ay isang mahusay na pamamaraan na ginagamit upang suriin ang mga pakikipag-ugnayan ng protina-protina. Ang pangunahing layunin ng coimmunoprecipitation ay ang pagkakakilanlan ng mga nakikipag-ugnayan na kasosyo tulad ng mga ligand, cofactor, o mga molekula ng pagbibigay ng senyas sa protina ng interes. Bukod dito, ang coimmunoprecipitation ay isang epektibong pamamaraan na ginagamit upang paghiwalayin ang mga protina mula sa serum, cell lysate, homogenized tissue, o nakakondisyon na media.
Ano ang Mga Pagkakatulad sa Pagitan ng Immunoprecipitation at Coimmunoprecipitation?
- Immunoprecipitation at coimmunoprecipitation ay dalawang uri ng precipitation reaction-based techniques.
- Maaaring gamitin ang parehong mga diskarte upang matukoy ang target na antigen sa pamamagitan ng isang partikular na antibody.
- Ang parehong mga diskarte ay lubos na nakadepende sa pakikipag-ugnayan ng antigen-antibody.
- Karaniwang ginagamit ang mga ito sa mga klinikal na laboratoryo.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng Immunoprecipitation at Coimmunoprecipitation?
Ang Immunoprecipitation ay isang pamamaraan na nagpapalabas ng protina mula sa solusyon gamit ang isang partikular na antibody, habang ang coimmunoprecipitation ay isang pamamaraan na nagpapalabas ng mga buo na protina complex mula sa solusyon gamit ang isang partikular na antibody. Kaya, ito ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng immunoprecipitation at coimmunoprecipitation. Higit pa rito, ang immunoprecipitation ay mas karaniwang ginagamit sa mga laboratoryo, habang ang coimmunoprecipitation ay hindi karaniwang ginagamit sa mga laboratoryo.
Ang infographic sa ibaba ay nagpapakita ng mga pagkakaiba sa pagitan ng immunoprecipitation at coimmunoprecipitation sa tabular form para sa magkatabi na paghahambing.
Buod – Immunoprecipitation vs Coimmunoprecipitation
Ang Immunoprecipitation at coimmunoprecipitation ay dalawang uri ng precipitation reaction-based techniques na nakadepende sa antigen-antibody interaction. Ang immunoprecipitation technique ay nagpapalabas ng isang protina mula sa solusyon gamit ang isang partikular na antibody, habang ang coimmunoprecipitation technique ay nagpapalabas ng mga buo na complex ng protina mula sa solusyon gamit ang isang partikular na antibody. Kaya, ibinubuod nito ang pagkakaiba sa pagitan ng immunoprecipitation at coimmunoprecipitation.
