Mahalagang Pagkakaiba – RPMI kumpara sa DMEM
Karamihan sa mga pag-aaral sa pananaliksik ay nagsasangkot ng pagkultura ng selula ng hayop at sa gayon, ang mga pag-aaral na ito ay nangangailangan ng pagpapanatili ng mga linya ng selula ng hayop sa ilalim ng mga espesyal na kondisyon ng paglaki. Ang pag-culture ng selula ng hayop ay malawakang ginagawa sa mga pharmacological na pag-aaral upang matukoy ang metabolismo ng gamot, sa mga diagnostic ng sakit at sa pananaliksik sa kanser. Ang cell culture media ay isang mahalagang aspeto ng animal cell culture. Ang Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) at Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) ay dalawang culture media na ginagamit sa animal cell culturing. Ang RPMI ay isang media na malawakang ginagamit sa kultura ng mga selula ng mammalian sa kultura ng suspensyon. Ang DMEM ay isang binagong uri ng basal medium, na may tumaas na amino acid at mga konsentrasyon ng bitamina hanggang sa apat na beses. Ginagamit ang DMEM sa pag-culture ng mga cell sa mga sumusunod na kultura. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng dalawang media ay ang uri ng kultura ng media. Ginagamit ang RPMI sa mga suspension culture, samantalang ang DMEM ay ginagamit sa pag-culture ng mga adherent cell.
Ano ang RPMI?
Ang RPMI o Roswell Park Memorial Institute Medium ay tinutukoy din bilang RPMI 1640. Ang pangalan ng media ay hinango ng instituto kung saan natuklasan ang media. Ang media na ito ay karaniwang ginagamit sa kultura ng selula ng hayop, lalo na para sa paglaki ng mga selulang mammalian. Ang mga ito ay orihinal na binuo upang palaguin ang mga lymphocyte ng tao.
Ang mga sumusunod na sangkap ay kasama sa RPMI.
- Glucose
- pH indicator (phenol red)\
- Mga asin (sodium chloride, sodium bicarbonate, disodium phosphate, potassium chloride, magnesium sulfate, at calcium nitrate)
- Amino acids
- Mga Bitamina (i-inositol, choline chloride, para-aminobenzoic acid, folic acid, nicotinamide, pyridoxine hydrochloride, thiamine hydrochloride, calcium pantothenate, biotin at riboflavin, cyanocobalamin)
Ang espesyal na tampok ng RPMI ay ang tumaas na konsentrasyon ng phosphate sa medium. Ginagamit ang RPMI sa isang 5% na kapaligiran ng Carbon dioxide. Magbibigay ito ng maximum at pinakamainam na kondisyon para sa paglaki ng cell. Ang pH ng media ay pinananatili sa 8.0 ng bicarbonate buffering system.
Figure 01: Cell Culture sa isang Petri Dish
Mga Application ng RPMI sa Cell Culturing
- Paglilinang ng mga T at B lymphocytes ng tao, Bone marrow cells at hybridoma.
- Ginamit para pag-aralan ang mga neoplastic cell ng tao.
Ano ang DMEM?
Ang Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) ay isang binagong medium na komersyal na inihanda. Ang orihinal na texture ng medium powder ay dilaw. Sa DMEM, ang konsentrasyon ng bitamina ay tumataas nang hanggang apat na beses at sa gayon ay tumataas ang nutrient content sa medium.
Ang DMEM ay binago din sa pamamagitan ng pagdaragdag ng higit pang mga asin gaya ng ferric nitrate, sodium pyruvate at ilang hindi mahahalagang amino acid tulad ng serine at glycine. Ang pagbabalangkas ng glucose sa media ay binago din. Ang orihinal na pormulasyon ay binubuo ng 1000 mg/L ng glucose, samantalang sa DMEM, ang konsentrasyon ay tumaas hanggang 4500 mg/L. Nangangailangan din ang DMEM ng supplementation ng serum medium dahil hindi ito kumpletong medium. Kadalasan, ang DMEM ay dinadagdagan ng Fetal Bovine Serum (FBS). Nagbibigay ang FBS ng kinakailangang mga protina at mga salik ng paglago para sa proseso ng pag-culture.
Ang pH ng medium ay nag-iiba sa pagdaragdag ng Sodium Bicarbonate. Ang pH ng medium bago magdagdag ng Sodium Bicarbonate ay nasa paligid ng 6.80 - 7.40, samantalang ang pH pagkatapos magdagdag ng Sodium Bicarbonate ay nasa hanay na 7.60 - 8.20. Ang temperatura ng storage ng medium ay 2 – 8 0C.
Figure 02: DMEM
Mga Application ng DMEM
- Upang pag-aralan ang kakayahan sa pagbuo ng plaque ng polyomavirus sa mga embryonic cell ng mouse.
- Sa mga pag-aaral sa pagsugpo sa pakikipag-ugnayan.
- Sa pagsasaliksik at pagsusuri sa mga kultura ng selula ng manok.
Ano ang Pagkakatulad sa pagitan ng RPMI at DMEM?
- Parehong ginagamit ang RPMI at DMEM sa animal cell culture.
- Ang RPMI at DMEM media ay mga likidong formulation.
- Ang parehong RPMI at DMEM media ay naglalaman ng mahahalagang amino acid, bitamina, at mga inorganic na asin na kinakailangan para sa paglaki.
- Ang parehong RPMI at DMEM media ay hindi kumpleto. Samakatuwid, dapat idagdag ang serum.
- Ang parehong RPMI at DMEM media ay gumagamit ng glucose bilang carbon source nito.
- Ang parehong RPMI at DMEM media ay may mas mataas na pH.
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng RPMI at DMEM?
RPMI vs DMEM |
|
| Ang RPMI ay isang medium na malawakang ginagamit sa kultura ng mga mammalian cell sa isang suspension culture. | Ang DMEM ay isang binagong uri ng basal medium na may tumaas na amino acid at mga konsentrasyon ng bitamina. |
| Presensya ng Extra Phosphates | |
| Nasa RPMI. | Wala sa DMEM. |
| Gamitin | |
|
Ginagamit sa kultura ng mga cell sa mga sumusunod na kultura. Nakasanayan na,
|
| Mga Uri ng Kultura | |
| RPMI ay ginagamit para sa mga kultura ng pagsususpinde. | DMEM ay ginagamit para sa mga kulturang may cell adhered. |
Buod – RPMI vs DMEM
Parehong ang RPMI at DMEM ay malawakang ginagamit sa pagkultura ng selula ng hayop lalo na sa kultura ng mga linya ng selula ng hayop kabilang ang mga lymphocyte sa vitro. Ang DMEM ay isang binagong basal medium kung saan mayroong tumaas na konsentrasyon ng nutrient. Ang RPMI na binuo ng Roswell Park Memorial Institute, at isa rin itong medium na ginagamit sa animal cell culturing lalo na para sa mammalian lymphocytes. Ang parehong media ay magagamit sa komersyo. Ito ang pagkakaiba sa pagitan ng RPMI at DMEM.
