Mahalagang Pagkakaiba – Flow Cytometry vs FACS
Sa konteksto ng teorya ng cell, ang mga cell ay ang pangunahing istruktura at functional unit ng lahat ng nabubuhay na organismo. Ang pag-uuri ng cell ay isang pamamaraan na ginagamit upang paghiwalayin ang iba't ibang mga cell ayon sa mga tampok na physiological at morphological. Maaari silang maging intracellular o extracellular na mga katangian. Ang pakikipag-ugnayan ng DNA, RNA, at mga protina ay itinuturing na intracellular interactive na mga katangian habang ang hugis, laki at iba't ibang mga protina sa ibabaw ay itinuturing bilang mga extracellular na katangian. Sa modernong-panahong agham, ang mga pamamaraan ng pag-uuri ng cell ay humantong sa pagtulong sa iba't ibang pagsisiyasat sa biological na pag-aaral at gayundin sa pagtatatag ng mga bagong prinsipyo sa pamamagitan ng pananaliksik sa medisina. Ang pag-uuri ng cell ay isinasagawa sa iba't ibang mga pamamaraan na kinabibilangan ng parehong primitive na may mas kaunting kagamitan at mga advanced na teknolohikal na pamamaraan sa paggamit ng sopistikadong makinarya. Ang daloy ng cytometry, fluorescent activated cell sorting (FACS), magnetic cell selection at single cell sorting ay ang mga pangunahing pamamaraang ginamit. Ang daloy ng cytometry at FACS ay binuo upang maiiba ang mga cell ayon sa kanilang mga optical na katangian. Ang FACS ay isang espesyal na uri ng flow cytometry. Ang daloy ng cytometry ay isang pamamaraan na ginagamit sa pagsusuri ng isang heterogenous na populasyon ng mga cell ayon sa iba't ibang mga molekula sa ibabaw ng cell, laki at dami na nagpapahintulot sa pagsisiyasat ng mga solong cell. Ang FACS ay isang proseso kung saan ang isang sample na pinaghalong mga cell ay pinagsunod-sunod ayon sa kanilang light scattering at fluorescence na mga katangian sa dalawa o higit pang mga lalagyan. Ito ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng flow cytometry at FACS.
Ano ang Flow Cytometry?
Ang Flow cytometry ay isang paraan na ginagamit upang suriin at matukoy ang pagpapahayag ng mga intracellular molecule at ibabaw ng cell at upang tukuyin at tukuyin ang mga natatanging uri ng cell. Ginagamit din ito sa pagtukoy ng dami ng cell at laki ng cell at upang suriin ang kadalisayan ng mga subpopulasyon na nakahiwalay. Ito ay nagbibigay-daan sa multi-parameter na pagsusuri ng mga solong cell nang halos magkasabay. Ang flow cytometry ay ginagamit sa pagsukat ng intensity ng fluorescence na nalilikha dahil sa mga antibodies na may label na fluorescently na tumutulong upang matukoy ang mga protina o ligand na nagbubuklod sa mga nauugnay na cell.
Figure 01: Flow Cytometry
Sa pangkalahatan, ang flow cytometry ay pangunahing kinabibilangan ng tatlong sub system. Ang mga ito ay ang fluidics, ang electronics, at ang optika. Sa flow cytometry, limang pangunahing bahagi ang magagamit na ginagamit sa pag-uuri ng cell. Ang mga ito ay, isang flow cell (isang stream ng likido na ginagamit upang dalhin ang mga ito at ihanay ang mga cell para sa optical sensing process), isang sistema ng pagsukat (maaaring may iba't ibang sistema kabilang ang, mercury at xenon lamp, high power water-cooled o low power air-cooled lasers o diode lasers), isang ADC; Analog to Digital Converter system, amplification system at isang computer para sa pagsusuri. Ang pagkuha ay ang proseso kung saan kinokolekta ang data mula sa mga sample gamit ang flow cytometer. Ang prosesong ito ay pinapamagitan ng isang computer na konektado sa flow cytometer. Sinusuri ng software na nasa computer ang impormasyong ipinadala sa computer mula sa flow cytometer. May kakayahan din ang software sa pagsasaayos ng mga parameter ng eksperimento na kumokontrol sa flow cytometer.
Ano ang FACS?
Sa konteksto ng Flow cytometry, ang Fluorescence-activated cell sorting (FACS) ay isang paraan na ginagamit sa pag-iiba at pag-uuri ng sample ng pinaghalong biological na mga cell. Ang mga cell ay pinaghihiwalay mula sa dalawa o higit pang lalagyan. Ang paraan ng pag-uuri ay batay sa mga pisikal na katangian ng cell na kinabibilangan ng light scattering at fluorescence na katangian ng cell. Ito ay isang mahalagang pang-agham na pamamaraan, na maaaring magamit upang makakuha ng maaasahang dami at husay na mga resulta ng mga signal ng fluorescence na ibinubuga mula sa bawat cell. Sa panahon ng FACS, sa una, ang pre-nakuha na pinaghalong mga cell; ang isang suspensyon ay nakadirekta sa gitna ng isang makitid na daloy ng likido na mabilis na dumadaloy. Ang daloy ng likido ay idinisenyo upang paghiwalayin ang mga cell sa suspensyon batay sa diameter ng bawat cell. Isang mekanismo ng vibration ang inilalapat sa stream ng suspension na nagreresulta sa pagbuo ng mga indibidwal na droplet.
Figure 02: FACS
Naka-calibrate ang system upang makagawa ng isang droplet na may isang cell. Bago ang pagbuo ng mga droplet, ang suspensyon ng daloy ay gumagalaw kasama ang isang fluorescence na kagamitan sa pagsukat na nakikita ang katangian ng fluorescence ng bawat cell. Sa punto ng pagbuo ng mga patak, ang isang de-koryenteng singsing sa pag-charge ay inilalagay kung saan ang isang singil ay na-induce sa singsing bago ang pagsukat ng intensity ng fluorescence. Kapag ang mga droplet ay nabuo mula sa suspension stream, isang singil ang nakulong sa loob ng mga droplet na pagkatapos ay pumapasok sa isang electrostatic deflection system. Ayon sa singil, inililihis ng system ang mga droplet sa iba't ibang lalagyan. Ang paraan ng paglalapat ng singil ay nag-iiba ayon sa iba't ibang sistemang ginagamit sa FACS. Ang kagamitang ginagamit sa FACS ay kilala bilang fluorescence activated cell sorter.
Ano ang Pagkakatulad sa pagitan ng Flow Cytometry at FACS?
Flow cytometry at FACS ay binuo upang ibahin ang pagkakaiba ng mga cell ayon sa kanilang optical properties
Ano ang Pagkakaiba sa pagitan ng Flow Cytometry at FACS?
Flow Cytometry vs FACS |
|
| Ang flow cytometry ay isang pamamaraan na ginagamit sa pagsusuri ng isang heterogenous na populasyon ng mga cell ayon sa iba't ibang mga molekula sa ibabaw ng cell, laki at dami na nagbibigay-daan sa pagsisiyasat ng mga solong cell. | Ang FACS ay isang proseso kung saan ang isang sample na pinaghalong mga cell ay pinagbubukod-bukod ayon sa kanilang light scattering at mga katangian ng fluorescence sa dalawa o higit pang mga container. |
Buod – Flow Cytometry vs FACS
Ang cell ay ang pangunahing estruktural at functional unit ng lahat ng buhay na organismo. Ang pag-uuri ng cell ay ang proseso kung saan ang mga cell ay nakahiwalay at naiba-iba sa iba't ibang kategorya batay sa kanilang mga intracellular at extracellular na katangian. Ang daloy ng cytometry at FACS ay dalawang mahalagang pamamaraan sa pag-uuri ng cell. Ang parehong mga proseso ay binuo upang ibahin ang mga cell ayon sa kanilang mga optical na katangian. Ang daloy ng cytometry ay isang pamamaraan na ginagamit sa pagsusuri ng isang heterogenous na populasyon ng mga cell ayon sa iba't ibang mga molekula sa ibabaw ng cell, laki at dami na nagpapahintulot sa pagsisiyasat ng mga solong cell. Ang FACS ay isang proseso kung saan ang isang sample na pinaghalong mga cell ay pinagsunod-sunod ayon sa kanilang light scattering at fluorescence na mga katangian sa dalawa o higit pang mga lalagyan. Ito ang pagkakaiba sa pagitan ng Flow Cytometry at FACS.
I-download ang PDF na Bersyon ng Flow Cytometry vs FACS
Maaari mong i-download ang PDF na bersyon ng artikulong ito at gamitin ito para sa mga offline na layunin ayon sa tala ng pagsipi. Paki-download ang bersyon ng PDF dito Pagkakaiba sa pagitan ng Flow Cytometry at FACS
