Mahalagang Pagkakaiba – CFU kumpara sa MPN
Ang Colony forming unit (CFU) at Most probable number (MPN) ay dalawang paraan na ginagamit upang mabilang ang mga microorganism sa mga sample. Ang parehong mga parameter ay ginagamit upang makita ang kalidad ng tubig at fecal indicator bacteria sa mga sample ng tubig. Ang unit na bumubuo ng kolonya ay isang sukat na ginagamit upang mabilang ang bilang ng mga mabubuhay na bacterial cell o fungal cell sa partikular na dami o bigat ng isang ibinigay na sample. Ang karaniwang yunit para sa parameter na ito ay CFU/ml o CFU/g. Ang pinakamalamang na numero ay isa pang yunit na ginagamit upang sukatin ang bilang ng mga mabubuhay na bacterial cell sa isang sample ng likido. Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng CFU at MPN ay ang CFU ay kinakalkula mula sa mga bacterial at fungal colonies na lumalaki sa isang solid agar plate habang ang MPN ay kinakalkula mula sa mabubuhay na bakterya na lumalaki sa isang likidong daluyan.
Ano ang CFU?
Ang Colony forming unit (CFU) ay isang parameter na sumusukat sa bilang ng mga viable bacterial o fungal cell sa isang ibinigay na sample. Ang pamamaraan na nagbibilang ng mga yunit na bumubuo ng kolonya ay tinutukoy bilang karaniwang bilang ng plato. Ang mga mabubuhay na kolonya na lumilitaw sa mga agar plate ay ipinahayag bilang CFU bawat 1 ml (unit bumubuo ng kolonya bawat milliliter) ng sample para sa mga likido o CFU bawat 1 g (unit bumubuo ng kolonya bawat isang gramo) ng sample para sa mga solid.
May dalawang karaniwang paraan na ginagamit upang sukatin ang CFU sa isang sample. Ang mga ito ay spread plate method at pour plate method. Ang dalawang pamamaraan na ito ay sinusuportahan ng isang pamamaraan na tinatawag na serial dilution. Ang mga serially diluted na sample ay nagbibigay-daan sa pagkuha ng mabibilang na bilang ng mga kolonya sa ibabaw ng agar. Ang isang kilalang dami ng sample ay maaaring ikalat sa ibabaw ng isang agar plate, o ihalo sa agar at ibuhos sa isang plato. Ang plato ay pagkatapos ay incubated at ang mga umuusbong na mga kolonya ay binibilang. Ang bilang ng mga kolonya ay nauugnay sa bilang ng mga mikroorganismo sa loob ng orihinal na sample. Ang mga plate na nagpapakita ng napakaraming kolonya o napakakaunting kolonya ay hindi kasama sa pagbibilang dahil ang mga resulta ay maaaring hindi tumpak ayon sa istatistika sa mga plate na iyon. Ayon sa istatistika, ang pinakamahusay na hanay ay 30 - 300 kolonya sa isang agar plate. Samakatuwid, ang tamang mga plato ay dapat piliin para sa tumpak na enumeration. Ginagawa ang serial dilution para sa function sa itaas.
Kapag binilang mo ang bilang ng mga mabubuhay na kolonya sa mga plato, maaaring kalkulahin ang CFU/ml gamit ang sumusunod na equation.
CFU bawat ml ng orihinal na sample=bilang ng mga kolonya sa isang plate X dilution factor
Dilution factor=(1/ Dilution of the plate)
Halimbawa, kung nakakuha ka ng 149 colonies sa plato ng 10-4 dilution, kung gayon ang bilang ng bacteria sa 1 ml ng orihinal na sample ay maaaring kalkulahin tulad ng sumusunod:
CFU/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 o 1490000
=1. 49 x 106
Figure 01: Colony Forming Unit
Ano ang MPN?
Ang pinakamalamang na numero ay isang alternatibong sukat sa CFU/ml. Tinatantya din ng MPN ang mga mabubuhay na cell sa isang sample ng likido. Binibilang nito ang mga organismo na lumalaki sa isang likidong kultura at isang pangunahing bacteriological na pamamaraan. Ang pamamaraang ito ay partikular na kapaki-pakinabang para sa mga sample na naglalaman ng mababang konsentrasyon ng mga bacterial cell; halimbawa, gatas, maiinom na tubig atbp. Ang halaga ng MPN ay ipinahayag para sa 100 ml ng volume. Umaasa ang MPN sa isang istatistikal na pamamaraan batay sa teorya ng posibilidad. May mga istatistikal na talahanayan na idinisenyo upang mahanap ang mga halaga ng MPN bawat 100 ml ng sample. Ipinapakita ng mga talahanayang ito ang mga resulta sa 95% na limitasyon sa kumpiyansa.
MPN value ay kinakalkula pagkatapos magsagawa ng technique na tinatawag na multiple tube fermentation method. Tatlong hanay ng mga tubo na naglalaman ng angkop na medium ng kultura ay inoculated na may tatlong magkakaibang volume ng sample tulad ng 10 ml, 1 ml, at 0.1 ml at incubated para sa paglaki. Pagkatapos ng panahon ng pagpapapisa ng itlog, ang mga tubo ay minarkahan ng + (positibo) o – (negatibo) para sa pagkakaroon o kawalan ng paglaki. Ang pattern ng positibo at negatibong mga resulta ay inihambing sa isang talahanayan ng MPN ng istatistikal na probabilidad upang matantya ang bilang ng mga microorganism. Pagkatapos ay ibinibigay ang halaga ng MPN para sa 100 ml ng sample. Ang MPN ay malawakang ginagamit upang makita ang coliform bacteria na nasa mga sample ng tubig.
Figure 02: MPN table
Ano ang pagkakaiba ng CFU at MPN?
CFU vs MPN |
|
| Ang CFU ay isang sukat na ginagamit upang ipahayag ang bilang ng mga mabubuhay na bacterial o fungal colonies sa isang partikular na sample. | Ang MPN ay isang alternatibong panukala sa CFU at sinusukat ang bilang ng mga viable bacterial cell sa isang liquid sample. |
| Yunit | |
| CFU/ml o CFU/g | MPN/100 ml |
| Pagkalkula | |
| Ang CFU ay kinakalkula sa pamamagitan ng pagbibilang ng bilang ng mga kolonya na lumaki sa mga agar plate. | Kinakalkula ang MPN sa pamamagitan ng paghahambing ng mga positibo at negatibong pattern ng mga tubo sa talahanayan ng istatistika ng MPN. |
| Serial Dilution Technique | |
| Isinasagawa ang serial dilution bago ilagay ang mga sample sa mga agar plate. | Hindi karaniwang ginagawa ang serial dilution kapag kinakalkula ang MPN |
| Mga Paraan | |
| Spread plate method at pour plate method ay dalawang uri ng paraan na ginagawa para makakuha ng CFU. | Multiple tube fermentation ang paraan na ginagawa para makakuha ng MPN value. |
Buod – CFU vs MPN
Ang pagsukat sa microbial growth ay kinakailangan para sa maraming dahilan. Sa mga plantang nagpoproseso ng pagkain, kinakailangang sukatin ang antas at uri ng mga mikroorganismo sa pagkain. Sa industriya ng pagkain at gamot, kinakailangan upang matiyak na ang mga paggamot sa isterilisasyon ay epektibong inilalapat. Sa mga planta ng paggamot ng dumi sa alkantarilya, kinakailangang regular na kumuha ng microbial count. Kapag nag-optimize ng pamamaraan sa molecular biology, kinakailangan upang sukatin ang bilang ng mga kolonya sa mga plato. Samakatuwid, mayroong iba't ibang mga paraan ng pagsukat ng enumeration at paglago na magagamit. Ang CFU at MPN ay dalawang ganoong pamamaraan na malawakang ginagamit sa iba't ibang larangan. Ang CFU ay isang sukatan ng bilang ng mga mabubuhay na kolonya ng bacteria at fungal na nasa isang ibinigay na sample. Kinakalkula ito gamit ang standard plate count method o viable plate count method. Ang MPN ay isa pang sukatan na nagpapahayag ng bilang ng mga bacterial cell na naroroon sa isang ibinigay na dami ng sample ng likido. Kinakalkula ito gamit ang multiple tube fermentation method at MPN table. Ito ang pagkakaiba sa pagitan ng CFU at MPN.
I-download ang PDF Version ng CFU vs MPN
Maaari mong i-download ang PDF na bersyon ng artikulong ito at gamitin ito para sa mga offline na layunin ayon sa mga tala sa pagsipi. Paki-download ang bersyon ng PDF dito Pagkakaiba sa pagitan ng CFU at MPN.
